32.11
연구원들은 정제 및 검출을 용이하게 하기 위해 태그라고도 하는 알려진 단백질 염기서열로 관심 단백질을 라벨링할 수 있습니다.
단백질을 태그하기 위해 먼저 뉴클레오티드 서열을 융합 태그를 포함하는 발현 벡터에 삽입합니다.
그런 다음 벡터는 재조합 또는 융합 단백질을 생산할 수 있는 숙주 세포에 도입됩니다.
의도한 다운스트림 애플리케이션에 따라 다양한 유형의 융합 태그를 사용할 수 있습니다.
항원결정기 태그는 항체를 사용할 수 없는 단백질을 연구하거나 검출하는 데 사용할 수 있습니다. 단백질에 c-Myc 펩타이드와 같은 알려진 항원결정기 태그가 지정되면 c-Myc에 대해 시판되는 항체를 사용하여 쉽게 검출하거나 정제할 수 있습니다.
2 내지 10개의 히스티딘 잔기를 함유하는 히스티딘 태그도 단백질에 융합될 수 있습니다. 폴리히스티딘 태그가 지정된 단백질은 2가 니켈 또는 코발트 이온을 포함하는 금속 이온 친화성 크로마토그래피 컬럼을 사용하여 정제할 수 있습니다.
녹색 형광 단백질 또는 GFP와 같은 형광 태그는 빛에 노출되면 형광을 방출합니다. 그러므로, GFP 표지된 단백질은 형광 현미경 검사법을 사용하여 살아있는 세포 안에서 가시화될 수 있습니다.
단백질은 여러 세포 과정과 생화학 반응에 관여합니다. 관심 있는 특정 단백질을 분석하려면 해당 단백질을 세포의 다른 단백질로부터 분리해야 합니다. 이는 적절한 숙주에서 특정 유전자를 과발현하여 대량의 표적 단백질을 생산함으로써 달성됩니다. 태그 또는 라벨은 유전자와 재…
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