두뇌에 게이트웨이 : 프리 메이트 '눈'을 분석 해 봅시다

요약

비 인간 영장류가 개발 및 노화에 대한 우리의 이해를위한 중요한 translational 수종이다. 영장류 망막의 해부 학적 조직은 인간의 정상 및 병리 학적 조건에 중요한 통찰력을 제공할 수 있습니다.

초록

인간의 시각 시스템은 세계의 관문으로 간주하고 감각, 지각 및인지 과정의 과다에 주요 역할을합니다. 그것은 비전의 품질은 삶의 질을 묶어 것을 따라서 놀라운 일이 아닙니다. 시각 장애의 원인을 둘러싼 광범위한 임상 및 기초 연구에도 불구하고, 그러한 retinitis pigmentosa과 황반 변성 등 시각 장애, 여러 형태의 효과적인 치료를 부족합니다. 비 인간 영장류는 인간의 것과 눈 개발의 가장 일반적인 기능을 가지고 있습니다. 뿐만 아니라 그들은 유사한 혈관 해부학을 가지고 있지만, 다른 포유 동물 사이, 영장류가 높은 영상 시력, fovea에 대한 전문 시간적 망막에서 영역을 갖는 독특한 특성을 가지고 할

프로토콜

1 부 : 조직의 사전 처리

1. 조직은 잘 paraformaldehyde, 글루 타 알데히드, 또는 포르말린과 perfused해야합니다. 이것은 일반적으로 다른 장기를 수확하는 데 사용되는 표준 transcardial 재관류를 통해 달성될 수있다. 그것은 얼마 후이 눈이 그냥 렌즈에 따라 정착액과 주입과 정착액에 저장 희생하는 것이 좋습니다.
2. 현재 연구에서 주제가 깊이 나트륨 pentobarbital (25 MG / kg, IV)의 과다로 euthanized 케타민을 하이드로 클로라이드 (10 MG / kg, IM)과 진정했고 완전히 exsanguinated 때까지 0.1 M PBS로 transcardially perfused. 이것은 5 분 (~ 1리터)을 PBS에 4 % paraformaldehyde 솔루션옵니다.

2 부 : 궤도 구멍에서 안구 제거

1. 눈알을 쉽게하기 위해 그것은 먼저 두뇌를 제거하는 것이 좋습니다. 두뇌가 삭제되면 얇은 벽으로 둘러싸인 궤도 뼈가 쉽게 분명합니다. 서서히 궤도의 장벽을 멀리 칩에 뼈 rongeurs을 사용합니다. 메스로 안구 근육을 버려야하고 안구의 결합 조직을 제거합니다. 조심스럽게 시신경을 잘라, 이것은 전자 현미경 연구에서 사용할 수 ....

토론

wholemount로 망막의 준비는 지형과 신경절 세포 레이어 또는 망막 혈관 ³ 내피 세포 중의 공간적 분포의 분석을 위해 수 있습니다. 영장류 망막의 주변에있는 세포 밀도 부량이 쉽게 수행됩니다. 그러나 perifoveal 및 foveal 지역에서 신경절 세포 레이어에 여러 레이어 스태킹은 부량을 방해. 이러한 잠재적인 편견을 회피하려면, fovea 및 perifoveal 지역은 코로나 비행기 ^2,4 년 반 얇은 섹션을 얻기 위해 ultramicrotome를 사용하여 wholemount 준비에서 해부 Epon에 포함된, 그리고 순차적으로 sectioned 수 있습니다. 대체 샘플링 패러다임과 함께 극복할 수있는 wholemount 준비, 다른 단점이 많습니다.

망막에서 사시 샘플을 채취하고 그라 이오 스탯이나 vibratome 중의 코로나 비행기에 sectioning 것은 쉽게 wholemount 준비에 수행할 수없는 다른 레이어의 .......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
메스	Fine Science Tools	10003-12
메스 날	Fine Science Tools	10011-00
스프링 가위	Fine Science Tools	15020-15
가위	Fine Science Tools	14090-11	모든 수술용 가위 사용 가능
론저(Rongeurs)	Fine Science Tools	16121-14
포셉	Fine Science Tools	11027-12
여과지	Fisher Scientific	09-924-150
낙타털 또는 세이블 털 붓	모든 공급업체