에 잔 심장을 떠올리 Drosophila</em

요약

기술은 애벌레와 어른의 뛰는 심장을 시각화에 필요한 Drosophila 제공됩니다. 각 생활 단계는 다른 방법론이 필요합니다.

프로토콜

당신이 시작하기 전에

성인 심장

1. 갓 인공 hemolymph (AH) 108mM 나를 포함하는 솔루션 ^+, 5mM K +, 2mM 칼슘 ^{2 +,} 필름 MgCl _2, 1mM 아니 ₂ PO _4, 4mm짜리 NaHCO _3, 10mM 자당, 5mM trehalose, 5mM HEPES (산도 7.1의 모든 시약의 준비 시그마 화학). 자당과 trehalose는 세균 오염을 방지하기 위해 사용하는 직전 냉장 주식 솔루션에서 AH에 추가되어 있어야합니다.
2. 상온 및 최소한 15 분 공기 버블링에 의해 산소 솔루션 AH 가져와.
3. 지방 제거에 필요한 몇 가지 좋은 모세 혈관 (예 : 유리 모세 혈관, 100ul, VWR) 당겨라.

애벌레의 마음

1. Sylgard - 코팅 coverslips : 22x22mm coverslip에 Sylgard 솔루션의 50 70μl에 대한 이쑤시개, 전송을 사용합니다. ° C 밤이여 65 Sylgard 강화하자.
2. Broadie 및 베이트의 버퍼를 (., 산도 7.....

토론

Drosophila 모델 embryological 개발에서 학습 및 메모리에 이르기까지 과학 질문 다양한 주소로 사용되었습니다 강력한 유전자 도구로 입증되었습니다. 최근이 다양한 모델 생물이 비행의 심장 기능의 유전자를 조사하는 데 사용되었습니다. 성인 Drosophila의 심장 생리를 정할 시도의 숫자가 복부 표피를 통해 그대로 파리에서 만들어진 관측에 의존합니다. 이러한 방식의 대부분은 하나의 매개 변수, 심장 박동수를 정할 수있는 복부를 통해 빛의 강도 송신기에서 영상 감시하거나 변경 기록에 의존합니다. 어떤 관찰되는 것은 심장의 수축에 보조 지방 단체의 움직임이며, 일반적으로은 심장의 앞쪽에 끝을 관찰 될 수 있으며, 심장에 신경 입력 그대로 :이 방법은 몇 가지 제한이 있습니다. 성인 세미 그대로 준비는 심장 박동 이외에 매개 변수의 개수의 기능 중심 허락 부량의 큰 부분의 자세한보기를 제공합니다. 그것은 기록 절차 (조브 문서를 참조, 1435) electrophysiological 또는 광 사용할 수 있습니다. 또.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
미세 해부용 스프링 가위 (곡형)	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5611	거친 절단에 적합 (단계 3)
미세 해부용 스프링 가위 (직형)	Roboz Surgical Instruments Co.	RS-5620
Dumont #55 포셉	Fine Science Tools	11295-51
Dumont #5 포셉	Fine Science Tools	11295-10
유리 모세관, 100ul	VWR international	53432-921
유리 모세관, 미세형	Science Products	GB100T8P
피펫 풀러	Sutter Equipment	P-97	수평 및 수직 피펫 풀러 모두 사용 가능
플라스틱 튜브	Tygon	1/16” 내경	100μl 모세관용
플라스틱 튜브	Tygon	1/32” 내경	소형 모세관용
Histoacryl® 조직 접착제	B. Braun Medical