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방법 논문

의 전극 제작 및 주입 Aplysia californica 손상, 자유롭게 행동 동물의 다중 채널 및 신경 근육질 레코딩을위한

12.7K 조회수

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DOI:

10.3791/1791

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2010년 6월 4일

이 논문에서

요약

기술은 넷 이온 주입에 대한 설명 생체내에 전극의 먹이 행동의 신경근육학 제어를 모니터링하는 Aplysia californica.

초록

의 주요 신경 및 근육에서 녹음

프로토콜

1. 전극 제작

  1. 전극을 만들려면, 약 2 미터 정도의 에나멜 코팅 0.001 인치 직경 스테인레스 스틸 와이어의 한 조각을 잘라 가위를 사용합니다. , 와이어의 각 끝에 퍼티의 작은 공을 첨부 절반 와이어를 접어, 그리고 트위스트 페어를 만들 끝을 스핀, 차등 전극했다.
  2. 테이프는 별을 이루는 물질을 방지하기 위해 전선의 끝을 모두. 식별을 위해 각 차동 전극 (그림 1A)에 대한 테이프의 다른 색상을 사용하여 네 미분 전극을 확인하십시오.
  3. 이인치를 떠나 함께 미분 전극의 트위스트 두 상대방에 한쪽 끝을 1 인치에 untwisted. 차동 전극의 나머지 쌍 (그림 1B)와 반복합니다.
  4. 엔드 untwisted 남아 있는지 확인하고, 두 차동 전극의 두 세트를 트위스트. 전극 어셈블리를 잡고 끝까지 무료로 떠나, 네 개의 차동 전극의 교차점에서 가정용 실리콘 접착제를 적용합니다. 잠깐 만요 및 접착제는 최소한 4 시간 (그림 1C)에 대한 건조하실 수 있습니다.
  5. 가지를 보온하려면, 나무 같은 조각은 평평, 이동, 표면에있는 전극 어셈블리를 내려 놓 아라. 끝을 밖으로 팬 테이프를 확보. 그냥 가지 전에 전극 어셈블리를 강화하고, 그 테이프 확보 플라스틱의 작은 조각을 사용합니다.
  6. 해부 현....

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토론

이 음반이 성공적으로 만들었 주요 혁신 하나의 케이블로 전극을 결합합니다. 두 전극 기록은 이전에 사용 아니고 넷 개인 전극을 확대하는 것은 종종 정상적인 먹이의 움직임을 만들기에서 동물을 방해 수술 adhesions의 형성 결과되었습니다. 한 케이블에 전극을 결합하면 차례로 면역 반응을 감소 동물, 내부 전극의 대량 감소하고 동물보다 자유롭게 이동할 수 있습니다.

이 절차의 또 다른 혁신적인 측면은 신경이나 근육에 전극을 부착 Superglue과 퀵 - 실의 조합입니다. 이전 단지 Superglue 사용했다지만, 두 glues의 조합이 더 안정적으로 작동하고 더 이상 물에 노출되면 약 3 일 이내에 고장 Superglue보다 몇 일간 지속될 수 있습니다.

우리는 그것이 개인 식별 뉴런의 세포 기관에서 기록 또는 자극에 대해 그대로, 행동 동물 세포 전극을 이식 수 있습니다 것을 보여주 [워맨와 Chiel, 1995;. 류 .......

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감사의 글

우리는 기꺼이 NIH (NS047073에 HJC)의 지원을 인정합니다. 우리는 또한 우리의 어플 리케이션을 위해 사용하는 것이 좋습니다 퀵 - 실상과 그녀의 초기 실험 캐서린 캘에 감사하고 있습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
에나멜 코팅 스테인리스 스틸 와이어California Fine Wire Company0.001D, 코팅 h
가정용 실리콘 II 접착제GE Healthcare
Kwik-Sil 접착제World Precision Instruments, Inc.
Duro Qwik-Gel 순간접착제Henkel Corp
A-M Systems model 1700 증폭기A-M Systems필터 설정: 신경 100-1000Hz, I2 근육 10-1000Hz
Axoscope 10.1Molecular Devices
금도금 커넥터 핀BulginSA3148/1
금도금 커넥터 소켓BulginSA3149/1

참고문헌

  1. Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
  2. Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity ....

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재인쇄 및 허가

태그

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