초파리 굴을 파고 터널을 파는 분석: 파리 유충의 조직 저산소증을 평가하는 방법

이 논문에서

초록

이 비디오는 초파리 유충의 굴 및 터널링 능력을 평가하여 저산소증을 테스트하는 방법을 보여줍니다. 이 기술을 사용하여 연구자들은 산소 결핍을 경험하는 유충과 발달 결핍이 있는 유충을 구별할 수 있습니다. 예시 프로토콜은 이 분석에 대한 설정을 보여줍니다.

프로토콜

이 프로토콜은 Qiang et al., A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018)에서 발췌한 것입니다.

1. 유충의 준비

분석을 시작하기 2일 이상 전에 Wieschaus 및 Nusslein-Volhard가 설명한 대로 50mL 폴리프로필렌 비커와 포도 한천을 포함하고 효모 페이스트를 바르고 사용 직전에 효모 페이스트를 바르는 6.0cm 일회용 페트리 접시를 사용하여 달걀 낳기 접시에 원하는 실험 및 대조군 조합(각각 최소 20명의 암컷과 10명의 수컷)의 십자가를 설정합니다. 파리는 달걀을 낳은 접시에 담아 필요할 때까지 실온의 어둠 속에서 보관하십시오.
포도 한천 레시피 – 100L 유리 비커에 100mL 냉동 포도 주스 농축액, 350mL 탈이온수, 5mL 빙하 아세트산 및 13g D. melanogaster 한천을 결합합니다. 전자레인지는 한천이 모두 용해될 때까지 1-2분 동안 폭발 사이에 저어줍니다. 용액을 몇 분 동안 식힌 다음 95% 에탄올에 10%....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름	회사	카탈로그 번호	댓글
시약
탈수 효모
냉동 포도 주스 농축액	웰치스(Welch's)		대부분의 대형 슈퍼마켓에서 구입할 수 있습니다
빙초산	시그마-알드리치	320099
초파리 한천	Apex Bioresearch 제품	66-103
메틸-파라-하이드록시벤조에이트	Apex Bioresearch 제품	20-658
설비
50ml 폴리프로필렌 비커
6.0cm 일회용 페트리 접시	송골매	08757100B
10cm 일회용 플라스틱 페트리 접시	E+K 사이언티픽	EK-24104
플라스틱 microspatulas	코닝 주식회사	3012
구부러진 놀리는 바늘	나스코	S08848MH
해부 현미경			10-30X 배율의 모든 현미경

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