Drosophila melanogaster의 수명 프로토콜: 파리 수명의 차이를 식별하기 위한 생존 곡선 생성

초록

출처: Bovier, T. F., et al. Drosophila melanogaster에서 내분비 파괴를 테스트하는 방법. J. Vis. 특급 (2019).

과학자들은 초파리 수명 프로토콜을 사용하여 다양한 실험 조건이 파리의 수명에 어떤 영향을 미치는지 측정하고 그 과정에서 생존 곡선을 생성하여 실험 결과를 정량화합니다. 샘플 프로토콜은 17-α-에티닐에스트라디올(EE2)과 같은 다양한 농도의 내분비 교란 물질 화학 물질(EDC)에 대한 노출이 수명에 미치는 영향을 연구하기 위해 적용되는 분석을 특징으로 합니다.

프로토콜

이 프로토콜은 Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019)에서 발췌

한 것입니다.

1. 음식 준비

1. 재고 유지 및 유충 성장을 위해 분말 효모 3%, 자당 10%, 미리 조리된 옥수수 가루 9%, 한천 0.4%를 포함하는 옥수수 가루 배지를 사용하여 옥수수 가루 배지(CM)라고 합니다.
   1. 수돗물 100mL에 이스트 30g을 넣고 끓여서 15분간 끓인다.
   2. 별도로 미리 조리된 옥수수 가루 90g, 설탕 100g, 한천 4g을 수돗물 900mL에 잘 섞습니다.
   3. 용액을 끓여서 불을 낮추고 계속 저어가며 5분간 조리합니다.
   4. 5분 후 뜨거운 이스트 용액을 넣고 15분 더 끓입니다.
   5. 열원을 끄고 용액을 약 60°C로 냉각시킵니다.
   6. 에탄올에 10% 메틸 4-하이드록시벤조에이트 5mL/L를 넣고 완전히 섞은 다음 10분 동안 그대로 둡니다.
      참고: 고농도의 살균제는 유충에게 치명....

결과

그림 1: 수명 곡선. 왼쪽에는 전체 실험 기간 동안 처리군(중간 + EDC[0.05 mM EE2])과 대조군(중간 + 용매) 모두에 대해 3일마다 죽은 파리의 수가 기록된 대표 표가 보고되어 있습니다. 각 그룹의 평균 수명은 MATRIX SUM을 사용하여 계산되었습니다. 제품; 치료군은 대조군에 비해 평균 수명이 단축되었다. 오른쪽에는 EE2(0.05mM) 또는 대조군에 에탄올만 포함된 배지를 공급받은 수컷 파리의 일반적인 생존 곡선이 표시됩니다. 생존 곡선은 대조군보다 치료된 파리에서 더 빠르게 감소했으며, 더 이른 전환 낙하 지점이 있었습니다. 이 그림의 더 큰 버.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
17α-에티닐에스트라디올	시그마	E4876-1G
초파리 배지를 위한 한천	바이오시그마	789148
옥수수 가루	CA 비앙카
초파리 바이알	바이오시그마	789008	25mm x 95mm
초파리 바이알	바이오시그마	789009	29mm x 95mm
초파리 바이알	칼텍	187	22mm x 63mm
에탄올	플루카	2860
유리병			250mL 병
유리 바이알	마이크로텍	세인트 10024	플랫 바닥 튜브 100 x 24
즉각적인 성공 효모	에스카		가루 효모
메틸4-하이드록시벤조에이트	시그마	H5501
LED 조명이 있는 실체현미경	라이카		시즌 4E
자당	하이미디어	MB025
핸드 블렌더 피미	아리에테		푸드 프로세서

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