수유 테스트: Drosophila melanogaster의 수유 선호도 평가

초록

출처: Bovier, T. F., et al. Drosophila melanogaster에서 내분비 파괴를 테스트하는 방법. J. Vis. 특급 (2019).

이 비디오는 착색된 사료를 사용하여 먹이를 모니터링하고 첨가된 화합물이 먹이 활동에 미칠 수 있는 영향을 모니터링하는 초파리에 대한 먹이 분석을 설명합니다. 예시 프로토콜은 여러 내분비 교란 화학물질(EDC)의 효과를 테스트합니다.

프로토콜

이 프로토콜은 Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019)에서 발췌

한 것입니다.

1. 공급 분석

참고: 이 분석은 배지에 선택된 EDC의 존재가 파리의 먹이에 영향을 미칠 수 있는지 테스트하는 데 권장됩니다.

1. 15마리의 어린 파리를 선택한 EDC와 착색 식품의 다양한 농도가 보충된 옥수수 가루 배지(CM)가 들어 있는 바이알에 넣습니다. 파리가 1일 동안 배지를 먹도록 허용합니다.
   참고: 예를 들어, 빨간색 염료 40번(1mg/mL)을 사용합니다.
2. 15마리의 어린 파리를 CM이 들어있는 바이알에 넣고 용제만 보충하고 방제를 위한 착색 식품을 넣습니다. 파리가 1일 동안 배지를 먹도록 합니다.
3. 에테르로 파리의 각 그룹을 개별적으로 마취합니다.
   1. 각 그룹의 파리를 열린 끝에 깔때기가 삽입된 원통형 유리 용기(에테르라이저)로 옮기고, 깔때기 위로 바이알을 뒤집고, 두 용기를 부드럽게 두드려 파리가 에테르라이저로 떨어지도록 합니다.
      참고: 깔때기는 그들이 에테르라이저에서 나오는 것을 방지합니다.
   2. 마우스 패드와 같은 부드러운 표면에 에테르라이저를 부드럽게 두드려 파리를 쓰러뜨리고 깔때기를 에테르에 적신 면과 거즈 플러그로 빠르게 교체합니다.
   3. 파리가 바닥으로 떨어지고 움직임을 멈출 때까지 약 1분 정도 기다립니다.
      참고: 시간을 초과하지 않으면 파리가 죽습니다.
4. 움직이지 않는 파리를 실체 현미경 아래에 놓고 대조군에 대한 각 치료 그룹의 복부 착색을 비교합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
17α-에티닐에스트라디올	시그마	E4876-1G
초파리 배지를 위한 한천	바이오시그마	789148
비스페놀 A	시그마	239658-50지
비스페놀 AF	시그마	90477-100MG
옥수수 가루	CA 비앙카
디 에틸 에테르	시그마
초파리 바이알	바이오시그마	789008	25mm x 95mm
초파리 바이알	바이오시그마	789009	29mm x 95mm
초파리 바이알	칼텍	187	22mm x 63mm
에탄올	플루카	2860
에테르라이저	공예		면 플러그가 있는 원통형 유리 용기
핸드 블렌더 피미	아리에테		푸드 프로세서
즉각적인 성공 효모	에스카		가루 효모
붉은 염료 No. 40	시그마	16035
LED 조명이 있는 실체현미경	라이카		시즌 4E

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