CApillary FEeder (CAFE) 분석: 초파리의 식품 소비 및 선호도를 추적하는 방법

초록

출처: Diegelmann, S., et al. CApillary FEeder Assay는 Drosophila melanogaster의 식품 섭취량을 측정합니다. J. Vis. 특급 (2017).

이 동영상은 제한되지 않은 초파리의 먹이 섭취와 선호도를 측정하는 행동 방법인 CApillary FEeder 또는 CAFE 분석에 대해 설명합니다. 주요 프로토콜은 음식을 전달하고 섭취량을 추적하는 데 사용되는 액체로 채워진 모세혈관에서 증발을 최소화하면서 분석을 수행하는 방법을 보여줍니다.

프로토콜

이 프로토콜은 Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017)에서 발췌

한 것입니다.

1. CApillary FEeder Assay 조립 및 수행

1. 공복이 필요하지 않은 경우, 탭핑 또는 블로우 파이프를 사용하여 실험용 파리를 분석으로 옮깁니다. 증발을 정량화하기 위해 파리가 없는 3개의 제어 바이알을 포함해야 합니다.
2. 외부 개구부 중 하나를 닫고 있는 피펫 팁(2 - 20 μL 부피)을 조심스럽게 제거하고 채워진 유리 모세관을 하단부터 삽입합니다. 피펫 팁을 모세관 옆에 다시 놓아 모세관을 고정합니다. 여러 식품 용액을 테스트하는 경우 그에 따라 이 절차를 반복하십시오.
3. 식품 공급원이 다른 높이(뚜껑에서 3 - 4cm)에 있는 경우 발생할 수 있는 편향을 피하기 위해 모든 바이알 내부의 모세관 끝을 동일한 높이로 배치하십시오. 실수로 여과지나 식품 공급원의 다른 점도를 만져 모세관이 누출되는 것을 방지하기 위해 여과지와 거리를 유지하십시오.
4. 마커 펜을 사용하여 착색된 ....

결과

그림 1: Drosophila melanogaster CApillary FEeder 분석. A) 파리를 이용한 먹이 분석. 축축한 여과지는 바이알 바닥에 물을 공급합니다. 실험 중에 4개의 모세혈관이 제공됩니다(반대쪽 모세혈관에 빨간색과 파란색 음식). 모세관은 두 번째 피펫 팁으로 제자리에 고정되고 사용하지 않는 위치는 피펫 팁을 사용하여 닫힙니다. 뚜껑 중앙에 있는 폼 플러그는 공기를 교환할 수 있습니다. B) 뚜껑의 상세 보기. 절단 피펫 팁(2 - 20 μL, 빨간색 테두리)을 사용하지 않는 위치의 원뿔형 개구부에 삽입하고, 두 번째 피펫 팁을 절단 팁에 삽입하여 구멍을 닫습니다. 절단된 피펫 팁은 미세 모세관의 배치를 제어하는 데 사용되며, 절단되지 않은 팁은 모세관을 단.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
바이알(번식)	Greiner 바이오 원	960177	www.greinerbioone.com
바이알(CAFE 분석)	Greiner 바이오 원	217101	www.greinerbioone.com
Lid-CAFE 분석	작업장	–	–
플라스틱 상자, 낮은 벽	플라스타임	353	www.plastime.it
플라스틱 상자 덮개	작업장	–	–
모 세관	블라우브란트	참조 : 7087 07	www.brand.de
피펫 팁	Greiner 바이오 원	771290	www.greinerbioone.com
여과지 서클	왓맨	10호 311 804	www.sigmaaldrich.com
D(+)-자당	애플리켐	57-50-1	www.applichem.com
에탄올 앱솔루트	VWR 화학 물질	20,821,330	www.vwr.com
식용 색소(빨간색, E124)	백펀	10027	www.backfun.de
식용 색소(파란색, E133)	백펀	10030	www.backfun.de
비누 용액 (CVK 8)	CVH	103220	www.cvh.de
디지털 캘리퍼스	개런트	412,616	www.hoffmann-group.com
바이알(번식)			높이 9.8 cm, 지름 4.8 cm
바이알(CAFE 분석)			높이 8cm, 지름 3.3 cm
Lid-CAFE 분석			대학 작업장에서 생성하는, 기술적인 그림 공급하는 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
플라스틱 상자, 낮은 벽			플라스틱 그리드 인레이는 8 x 10 바이알 위치에 맞게 맞춤 제작되었습니다
플라스틱 상자 덮개			크기(37 x 29 x 18cm)
모 세관			DIN ISO 7550 표준, IVD 가이드라인 98/79 EG, 연마 끝
피펫 팁			바깥 쪽 원의 피펫은 뚜껑에 따라 절단됩니다.
여과지 서클			직경 45mm는 사용된 바이알에 맞게 접으면 잘 작동합니다.
D(+)-자당			유해하지 않음
에탄올 앱솔루트			고인화성 액체 및 증기
식용 색소(빨간색, E124)			명시되지 않음
식용 색소(파란색, E133)			명시되지 않음
비누 용액 (CVK 8)			냄새 중성 비누
디지털 캘리퍼스
표준 플라이 푸드			(20L용)
한천			160 그램
맥주 효모			299.33 지
옥수수 가루			1,200 지
당밀			1.6 리터
프로피온산			57.3 밀리리터
니파긴 30%			160 밀리리터

호 명 년 년 명