온도 구배 분석: 초파리 유충의 온도 선호도를 테스트하는 방법

Abstract

출처: Liu, J., et al. 초파리 유충의 열 선호도를 결정하기 위한 온도 구배 분석. J. Vis. 특급 (2018).

초파리 초파리는 작은 온도 변화를 구별할 수 있으므로 열 조건이 유리한 환경을 선택할 수 있습니다. 이 비디오는 선형 열 구배에서 초파리 유충의 온도 선호도를 테스트하는 행동 분석에 대해 설명합니다.

Protocol

이 프로토콜은 Liu et al.에서 발췌한 것입니다. 초파리 유충의 열 선호도를 결정하기 위한 온도 구배 분석, J. Vis. Exp. (2018).

1. 온도 구배 설정

1. 단방향 그라디언트 준비
   1. 분석 중 습한 주변 환경을 만들려면 두 개의 수조에 연결된 두 개의 알루미늄 블록을 젖은 종이 타월 위에 10cm 간격으로 놓습니다(그림 1A).
   2. 분석을 시작하기 ~2시간 전에 두 개의 수조를 켜서 알루미늄 블록의 온도가 평형을 이룰 수 있도록 충분한 시간을 허용합니다.
      참고: 원하는 선형 온도 구배를 달성하는 데 필요한 각 수조의 온도를 결정하기 위해 모의 실험을 수행하는 것이 좋습니다. 수조를 설정하기 위한 몇 가지 일반적인 온도 쌍이 표 1에 나열되어 있습니다. 그러나 표면 온도는 주변 온도의 영향을 받습니다. 튜브의 길이는 튜브에서 냉각이 있기 때문에 온도에도 영향을 미칩니다. 우리 설정에서 튜브의 길이는 1.5m입니다.
   3. 500mL의 ....

Results

그림 1: 단일 및 양방향 그래디언트 분석 설정. (A) 두 개의 알루미늄 블록에 두 개의 알루미늄 분석 플레이트가 있는 단방향 구배 설정. 알루미늄 블록의 온도는 두 개의 수조에서 물을 순환시켜 제어됩니다. (B) 양방향 구배를 위한 세 개의 알루미늄 블록, 수조 및 알루미늄 플레이트(250 x 220mm)의 배열. 왼쪽 및 오른쪽 블록은 동일한 수조에 연결되고 중간 블록은 다른 수조에 연결됩니다. 알루미늄 분석 플레이트는 테이프로 감겨 10% 아가로스를 포함하는 1mm 벽을 형성합니다. (C) 온도(점으로 표시)를 확인하고 접시에 유충을 방출하는 위치. 실험을 시작하기 전에 각 구역 내의 두 지점에서 온도를 확인하여 원하는 선형 온도 구배가 설정되었는지 확인하십시.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
그래디언트 분석 장치
PolyScience 9106, 냉장/가열식 6L 순환 수조	토마스 사이언티픽	9106	이 모델은 단종되었습니다. 업데이트된 교체 모델에는 120V, 60Hz용 1186R00 및 1197U04 또는 240V, 50Hz용 1184L08 및 1197U04가 포함됩니다.
알루미늄 분석 플레이트(단방향 구배용)			외부 크기: 14 x 10.1 x 0.9cm, 내부 크기: 12.9 x 8.7 x 0.8cm, 검은색 아노다이징 처리.
알루미늄 플레이트(양방향 그라디언트용)			25 x 22 x 0.2cm, 블랙 아노다이징 처리.
알루미늄 블록			외부 크기: 25.5 x 5 x 1.4cm, 내부 채널의 매개변수는 그림 1D에 나와 있습니다.
알루미늄 블록 및 튜브용 커넥터	맥마스터-카	91355K82
Tygon 위생 실리콘 튜빙	타이곤	57296	1/4 ID x 3/8 OD x 1/16 벽
이름	회사	카탈로그 번호	코멘트
분석용 항목 및 시약
막자	미국 과학	17361	1.5mL 마이크로 원심분리기 튜브용 유봉
온도계	요행수	51II
열전대	요행수	K형
범용 마이크로플레이트 뚜껑	코 닝	6980A77
35mm 접시	코 닝	9380D40
라벨링 테이프(양방향 그라디언트용)	피셔 사이언티픽	제15-951	Fisherbrand 라벨링 테이프 2인치 x 14야드
아가로스	인비트로젠	16500500	1% 용액 준비
자당	시그마	S0389-5KG	분석을 시작하기 직전에 18% 용액을 준비하십시오.
페인트 브러시	피셔 사이언티픽	11860
50 mL 원심분리기 튜브	덴빌	C1062-P
스쿠풀라	피셔 사이언티픽	14-357큐
500mL 둥근 입이 넓은 병	파이렉스	1395-500
셀 스트레이너(300mm 공극)	플루리셀렉트	Tel.: 43-50300	유충 세척을 위한 선택 품목
골판지 상자(바이알 트레이)	제네시 사이언티픽	FS32-124