초파리 Activity Monitor (DAM): 파리의 운동 활동을 측정하는 방법

초록

출처: Chiu, J. C., et al. 초파리의 일주기 리듬 및 수면 매개변수를 연구하기 위한 운동 활동 분석. J. Vis. 특급 (2010).

이 비디오는 운동 활동을 추적하는 데 사용되는 초파리 활동 모니터(DAM) 시스템에 대해 설명합니다. 연구원들은 DAM에서 수집한 활동 데이터를 사용하여 초파리의 일주기 리듬을 연구합니다. 주요 프로토콜 클립은 장치에 파리를 로드하고 일주기 실험을 위한 활동 데이터를 기록하는 방법을 보여줍니다.

프로토콜

이 프로토콜은 Chiu et al., Assay Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila, J. Vis. Exp.(2010).

1. Activity Tube 및 Locomotor Activity Monitoring System에 파리 적재

1. 파리를 활동 튜브에 넣기 전에 활동 모니터를 수용하는 데 사용할 인큐베이터를 켭니다. 인큐베이터 컨트롤을 사용하여 온도를 조정하고 DAM 시스템 조명 컨트롤러 또는 인큐베이터 자체 조명 제어 시스템을 사용하여 원하는 실험 설계에 따라 조명/어둡게 영역을 설정합니다. 파리를 activity tube에 넣는 데 필요한 시간은 온도가 안정화되기에 충분해야 합니다.
2. 이산화탄소로 파리를 마취하십시오.
3. 가는 붓을 사용하여 파리 한 마리를 활동 튜브에 부드럽게 옮깁니다.
4. 가는 집게로 약 1/2인치인 한 조각의 실 중간을 잡고 활성 튜브의 비식품 끝 부분에 실을 삽입하여 구멍을 막고 실험 중에 파리가 탈출하는 것을 방지하는 동시에 튜브로 공기 흐름을 허용합니다. 또는 작은 구멍이 있는 플라스틱 캡(....

결과

그림 1: FaasX를 사용하여 생성된 유도 그래프는 리드미컬한 야생형 파리(per+ 전이유전자를 운반하는 ^{파리 0}마리당 w)(A 및 B)와 ⁰ 돌연변이체당 부정맥 w(C 및 D)의 일일 운동 활동 리듬을 보여줍니다. 수컷 파리는 25 °C에서 유지하고 12:12 LD (밝은 : 어두운 색) 주기로 4 일 동안 동반 된 후 DD (지속적인 어둠)에서 7 일 동안 동반되었습니다. 각 플라이 라인에 대해 개별 파리(n>32)의 운동 활동 수준을 15분 빈에서 측정한 다음 평균을 구하여 해당 라인에 대한 그룹 프로필 대표를 얻었습니다. A와 C는 명암 주기(LD 2-3)에서 두 번째와 세 번째 날의 평균을 산출하여 생성된 활동 데이터를 보여주고, B와 D는 지속적인 어둠(DD 2-3)에.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
초파리 활동 모니터(DAM)	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠	DAM2 또는 DAM5	DAM2 모니터는 더 컴팩트하며 단일 인큐베이터에 더 많은 것을 넣을 수 있습니다
전원 공급 장치 인터페이스 장치(DAM 시스템용)	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠	PSIU9	PS9-1 AC 전원 공급 장치 포함
라이트 컨트롤러	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠	LC6
파이렉스 유리관	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠	PGT5, PGT7 및 PGT10
플라스틱 활동 튜브 캡	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠	캡5	플라스틱 캡 대신 실을 사용할 수 있습니다.
DAM 시스템 데이터 수집 소프트웨어	트라이키네틱스(Trikinetics) 주식회사; 월섬, 매사추세츠		Mac과 PC 모두에서 사용 가능한 버전
FaasX 소프트웨어	Centre National de la Recherche Scientifique		Mac 전용
Insomniac 2.0 소프트웨어	피츠버그 대학교 의과대학		Matlab에서 실행됩니다. PC와 매킨토시 모두에서 사용할 수 있습니다.
온도 및 일주일 제어 기능이 있는 환경 인큐베이터, 예: Percival 인큐베이터	퍼시벌 사이언티픽, Inc.	I-30BLL	실내 공간 차원: 폭: 65cm; 높이 : 86cm; 깊이: 55cm
온도 및 일주일 제어 기능이 있는 환경 인큐베이터(예: DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature	트라이텍 리서치, Inc.	05DT2CIRC001	내부 공간 차원 : 너비 : 36m; 높이 : 56m; 깊이: 28cm
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