터치 습관화 분석: 예쁜꼬마선충의 비연관 학습을 연구하는 방법

초록

출처: Mersha, M. D., et al. 저용량 독성 물질에 대한 배아 노출의 장기 행동 및 생식 결과. J. Vis. 특급 (2018).

이 비디오는 기계감각을 평가하고 습관화까지의 시간을 정량화하는 예쁜꼬마선충(C. elegans) 행동 방법인 터치 습관화 분석을 소개합니다.

프로토콜

다음 프로토콜은 Mersha et al.에서 발췌한 것입니다. 저용량 독성 물질에 대한 배아 노출의 장기 행동 및 생식 결과, J. Vis. Exp. (2018년)

1. 전방 터치 습관화 분석
   1. 약 10마리의 동기화된 어린 성충을 화재 멸균된 30G 백금 와이어 픽을 사용하여 파종되지 않은 새로운 NGM 플레이트로 옮깁니다. 지렁이가 새 접시에 적응할 시간을 주기 위해 5분 동안 방해받지 않고 그대로 두십시오.
   2. 습관화 반응을 위해 나무 꼬치나 이쑤시개 끝에 붙인 눈썹 털을 사용하고 70% 에탄올을 담그어 살균합니다. 보푸라기가 없는 깨끗한 티슈로 닦고 에탄올이 증발할 때까지 1분 동안 기다립니다. 눈썹 털을 사용하여 머리(인두구 앞쪽)에 있는 벌레를 부드럽게 만집니다. 웜이 회복될 수 있도록 터치 사이에 10초를 허용하고 터치를 반복합니다.
   3. 웜이 더 이상 뒤로 움직이지 않을 때까지 계속 터치합니다(10초 자극 간격 허용). 이 시점에서 기생충은 자극에 익숙해졌습니다. 웜이 습관화하는 데 필요한 터치 횟수+ber을 기록합니다.
   4. 일원 분산 분석(One-way ANOVA)을 사용한 후 Tukey의 사후 검정(Post Hoc test)을 사용하여 처리된 대조군과 처리되지 않은 대조군의 평균 습관화율 간의 차이를 분석합니다.

재료