제브라피시 회피 및 티그모타시스 분석: 혐오스러운 시각적 자극에 대한 반응으로 유충의 행동을 조사하는 고처리량 방법

Abstract

출처: Richendrfer, H., et al. 제브라피시 유충의 자동화된 고처리량 행동 분석. J. Vis. 특급(2013년)

이 비디오는 제브라피시 유충의 회피 및 도둑 모타시스 분석을 설명합니다. 이 비디오는 시각적 혐오 자극에 반응하는 제브라피시 유충의 행동을 조사합니다.

Protocol

1. 이미지 캡처

1. 플레이트의 각 레인에 최대 20 마리의 유충을 배치 할 수 있습니다. 일반적으로 레인당 5마리의 유충이 사용되어 수영 속도를 가장 정확하게 추적하고 실험당 필요한 유충 수를 줄입니다. 레인은 실험에 따라 의약품 또는 독성 물질이 있거나 없는 계란 물로 채울 수 있습니다. 그러나 레인은 이미징 캐비닛에 배치될 때까지 완전히 채워져서는 안 됩니다. 이렇게 하면 오버플로를 방지할 수 있습니다. 일관성을 위해 유충은 아가로스 주형에 넣고 노트북 화면 위에 놓은 후 10분의 순응 기간을 가져야 합니다. 유충을 페트리 접시에서 아가로스 레인으로 효율적으로 옮기면 유충 스트레스를 줄이는 데 도움이 됩니다. 이것은 유충이 얕은 수조나 페트리 접시에 보관되어 있을 때 가장 쉽습니다.
2. 이미징 캐비닛에는 타임랩스 촬영에 사용되는 Canon 디지털 카메라와 노트북이 포함되어 있습니다. 카메라는 캐비닛 상단에 배치하고 캐비닛 하단을 향하도록 해야 하며, 15.6인치 화면 노트북은 화면이 위를 향하도록 배치해야 합니다(그림 1). 4개의 플레이트는 노트북 화면 바로 위에 손으로 배치해야 합니다. 이때 레인은 계란물이나 화학 처리로 채워져 레인 상단과 수평이 되도록 할 수 있습니다(이미지에서 레인 가장자리의 그림자를 제거하기 위해....

Results

그림 1. 이미징 캐비닛.이미징 캐비닛은 당사 실험실에서 특별히 제작되었으며 고처리량 동작 분석에 사용되었습니다. 15메가픽셀 디지털 카메라를 캐비닛 상단에 부착하여 아래를 향하게 하여 노트북 화면 상단에 배치된 멀티레인 플레이트에서 유충의 타임랩스 이미지를 수집했습니다. 플레이트와 스크린 사이에는 수집된 이미지에서 모아레 패턴을 방지하는 데 사용되는 플라스틱 디퓨저가 있습니다.

그림 2. 빈 배경과 PowerPoint 혐오 자극. 이것은 제브라피시 유충의 행동 변화를 불러일으키는 데 사용되는 현재 PowerPoint입니다.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
이미징 캐비닛	우드크래프트 타워
아가로스	어부	BP1356-100
디지털 카메라	캐논 EOS	반란군 T1i
노트북	에이서 어스파이		15.6인치가 있는 한 모든 것이 좋습니다. 1366 x 768 픽셀 해상도와 220cd/m2 밝기의 LCD 화면.
하나의 웰 플레이트	어부	제12-565-493
파워포인트 2010	마이크로소프트
플라스틱 디퓨저	펜다플렉스	52345