근육주사(IM) 주사: 성체 제브라피쉬의 등쪽 근육으로 복합 전달

초록

출처: Myllymäki, H., et al. DNA 기반 백신의 전임상 스크리닝을 위한 성인 제브라피시 면역. J. Vis. 특급 (2018).

이 비디오는 성인 제브라피쉬의 등쪽 근육에 화합물을 전달하기 위한 근육 주사 기술에 대해 설명합니다.

프로토콜

1. DNA 백신 및 전기천공법 주입

1. 이 프로토콜에 따른 예방 접종을 위해서는 6-12개월 된 건강한 성인 제브라피시를 사용하십시오. 14/10시간 라이트/다크 주기의 플로우 스루 시스템에 물고기를 보관하고 물 1L당 최대 7마리의 물고기를 잡습니다.
2. 물고기를 마취하기 위해 탱크 물에 0.02% 3-아미노벤조산 에틸 에스테르(트리카인) 용액(pH 7)을 준비합니다. 10cm 페트리 접시 또는 이와 유사한 것을 사용하십시오.
3. 5L 비커에 3L의 깨끗한 시스템 물을 채워 회수 탱크를 준비합니다.
4. 예방 접종 중에 물고기가 고정된 위치에 있도록 예방 접종 패딩을 준비하십시오. 5 × 7cm 2cm 두께의 스펀지² 개를 가져 가라. 메스 날이나 날카로운 가위로 스펀지에 홈을 자릅니다.
   메모: 동일한 백신 패딩을 여러 실험에 사용할 수 있습니다. 실험 사이에 스펀지를 70% 에틸 알코올에 담가 소독하고 건조시킵니다.
5. 스펀지를 시스템 물에 완전히 담그고 스폰지를 페트리 접시에 놓습니다.
6. 예방 접종 24시간 전에 물고기를 금식하십시오.
7. 제브라피시 한 마리를 0.02% 트리카인이 함유된 페트리 접시에 올려 마취합니다. ....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
페놀 레드 나트륨 염	시그마-알드리치	114537-5지
트리카인(에틸 3-아미노벤조에이트 메탄설포네이트 염)	시그마	A5040-100G	Anestesia 및 안락사 솔루션
Tweezertrodes 전극(7mm) 키트	BTX 하버드 장치	BTX 450165	핀셋 타입 전극
알루미노실리케이트 모세관	하버드 기구	Tel.: 30-0108
마이크로 매니퓰레이터	나리시게	매사추세츠-153
현미경	올림푸스	ZS61
ECM 일렉트로 스퀘어 포레이터	BTX 하버드 장치	재질 보기 BTX ECM 830
플라스틱 숟가락
스펀지
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