제브라피시 환자 유래 이종이식편(zPDX): 암 모델

초록

출처: Wang L. et. al., 비교 약물 평가를 위한 숙주로 제브라피시 유충을 사용하는 췌장암의 환자 유래 이종 이종 이식 모델. J. Vis. 특급 (2019).

이 비디오는 제브라피시 환자 유래 이종 이식 모델을 만드는 기술을 설명합니다. 샘플 프로토콜에서는 췌장 종양 이종이식 모델에서 Gemcitabine 및 Navitoclax 약물의 효율성을 평가합니다.

프로토콜

1. 제브라피쉬에 혼합 세포 현탁액 주입

1. E3 물에 10x 트리카인 용액을 첨가하여 제브라피시 유충을 마취하고 유충(단계 2.3)을 변형된 E3(1g/L 글루코스 및 5mmol/L L-글루타민이 함유된 E3)로 채워진 주입 플레이트로 옮깁니다.
2. 25μL의 혼합 세포 현탁액을 마이크로 모세관 바늘에 채우고 바늘을 마이크로 주입 매니퓰레이터에 삽입합니다.
3. 사출 압력과 시간을 설정합니다. 50-80 세포(~8 nL)를 48 hpf 제브라피쉬의 난황낭에 주입합니다.

2. 이종 이식 제브라피쉬의 배양 (zPDX 모델)

1. 이종 이식 후 제브라피시 유충을 32°C에서 40mL의 혼합 용액(1g/L 포도당 및 5mmol/L L-글루타민이 있는 E3 용액)으로 옮깁니다.

3. 이종이식된 제브라피쉬에 대한 약물 투여 및 종양 세포/섬유아세포 생존력 평가

1. gemcitabine/navitoclax의 최적 농도 결정.
   1. 10개의 야생형 제브라피시 배아를 48hpf로 12웰 플레이트의 각....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
L-글루타민	지브코	21051024
젬시타빈	겜잔
메틸셀룰로오스	시그마	M0262
나비토클락스(ABT-263)	셀렉	S1001	Bcl-xL 억제제
설비
마이크로인젝터	나리시게
컨포칼 현미경	라이카	SP8	0.00

시리즈 호