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방법 논문

쥐에서 Orthotopic 힌드 - 림브 이식

11.1K 조회수

DOI:

10.3791/2022

2010년 7월 12일

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

여기서 우리는 금 본위 것으로 보인다 orthotopic 쥐 뒷다리 - 사지 이식 절차를 설명 생체내에 모델입니다.

초록

복합 조직 allotransplantation (CTA)는 이제 손, 팔 또는 숫자의 손실 후에 유효한 치료 옵션을 나타내고 재건 수술의 새로운 치료 법인되고 있습니다. 그러나, 장기적으로 높은 선량 다중 약물 치료는 광범위한 immunosuppressive 응용 프로그램을 halters 심각한 부작용의 위험을 베어링, 그래프트 생존을 보장하기 위해 필요합니다. 이 분야에 더 이상 진행은 기본적인 면역학 및 복합 조직 이식의 국소 빈혈 reperfusion의 부상의 이해에 따라 달라질 수 있습니다.

지금까지 쥐에 orthotopic 뒷다리 이식은 재건 이식 (RT)에 대한 선호하는 설치류 모델을했습니다, 그러나, 그것은 vasculature의 reattachment, 뼈, 근육과 신경에게 대한 특별한 microsurgical 기술을 필요로 매우 까다로운 절차입니다.

우리는 뒷다리 사지 이식을 밀고하는 신속하고 안정적​​인 접근을 제공하는이 모델에 대한 혈관 커프 문합 기술을 도입했습니다. 이 기술은 간소화하고 단축 수술을 성공적으로 높은 생존과 낮은 합병증 속도로 작업을 수행하기 위해 기본적인 microsurgical 경험 외과 수 있습니다. 기술은 물론 면역뿐만 아니라 국소 빈혈 reperfusion의 부상 (이리) 연구에 적합한 것 같습니다.

프로토콜

기증자 운영 및 힌드 - 림브 하베스트

  1. 수술 절차에 대한 microsurgical 악기 살균 집합이 활용됩니다. 외과 수술의 시작하기 전에 변경해야 멸균 장갑을 포함하여 적절한 복장을 착용해야합니다.
  2. 생쥐가 pentobarbital의 intraperitoneal 주사 (50mg/kg IP)와 anesthetized이며 전체 수술을 통해 안정적인 동물 체온을 용이하게 가열 작업 현장에 배치 부정사.
  3. 작업의 제기 피부 절개하기 전에 각 모두 세 번 살균이며, 살균제 및 알코올. 밖으로 건조에서 동물 각막을 방지하기 위해 눈이 수술하기 전에 안과 연고 (Vidisic)와 윤활 있습니다.
  4. 피부 절개는 약 사타구니 인대의 수준에서 오른쪽 사타구니에 걸쳐 이루어집니다. 대퇴 혈관이 양극성 소작과 무딘 절개 무료 해부되며 깊은 지점은 8-0 실크 출혈도 잡았 있습니다.
  5. 헤파린의 300μl (50 IU)를 방지 응고에 대한 성기 정맥을 통해 주입합니다.
  6. 대퇴 혈관이 사타구니 인대의 수준에 출혈도 잡았 그리고 묶인에 말초 절단됩니다.
  7. 뒷다리가로 플러시됩니다 심심풀이 (4 ° C) 오분 이상의 대퇴 동맥을 통해 HTK 솔루션 (5ml).
  8. 모든 근육 그룹이 급격하게 ....

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토론

실험 연구 수십년은 앞서 및 최근 과거에 성공적인 인간의 손으로 이식 활성화합니다. 1978 년, 샤피로 외. 물론 여러 가지 병적인, 생리 및 면역 측면뿐만 아니라, 복합 조직 이식의 기능 결과를 연구에 적합한 쥐에 orthotopic 뒷다리 이식 모델을 개발했습니다. 우리는 비 봉합 커프 기술을 도입하여, 즉 프로 시저의 가장 어려운 부분 혈관 문합을 수정했습니다. 그것이 높은 생존율 (80-90%)와 프로 시저를 수행하는 기본적인 microsurgical 경험 외과를 단순화하고 수술을 단축하고 있습니다 기존의 봉합 기술에 비해.

봉합 anastomoses, 출혈의 위험, 혈전증, 그리고 작은 꽃자루의 꼬임의 다양성없이 감소하고 있습니다. 이것은 적절한 커프 크기 선택과 최소 수 있지만 혈액이 처음 즉석 통과 루멘과 충돌 사이트에서 수축이나 난기류는 커프 기술의 새로운 잠재적인 위험이있다. 또한, 작은 크기 불일치가 쉽게 다시 다른 직경의 혈관을 suturing에 내재된 .......

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공개 사항

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Nembutal®OVATION Pharmaceuticals
헤파린 면역(Heparin Immuno)Ebewe Pharma
Custodiol HTK 용액Essential Pharmaceuticals
외막 가위(Adventitia Scissors)ASSIASSI®SAS-21 R-8T
포셉(Forceps)ASSIASSI®JFC-7
확장 포셉(Dilator Forceps)ASSIASSI®D-5AZ
폴리미드 튜브(Polymide Tubes)River Tech Medical#17; #19

참고문헌

  1. Shapiro, R. I., Cerra, F. B. A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb. J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).
  2. Petruzzo, P. The international registry on hand and composite tissue transplantation. Transplantatio....

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재인쇄 및 허가

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