Rabbit Intraductal Injection: Rabbit Mammary Gland로의 관심 용액의 국부적 전달

초록

출처: Clark et al., 토끼 유선으로의 관내 분만. J. Vis. Exp. (2017).

이 비디오에서는 토끼의 유선관에 관심 용액을 투여하는 기술을 설명하고 조영제의 고해상도 초음파 영상으로 전달을 확인합니다.

프로토콜

1. 수술 전 준비

1. 각 토끼의 체중을 기록합니다. 모든 전임상 연구와 마찬가지로 동물의 체중을 정기적으로 모니터링하여 잠재적 독성을 평가하십시오.
2. 토끼를 마취하기 전에 50mL 원뿔형 튜브에 시판되는 초음파 젤을 채우고 500 x g에서 30초 동안 회전합니다. 원심분리가 완료되면 겔에 눈에 보이는 기포가 없어야 합니다.
3. 글리코피롤레이트를 0.1mg/kg의 용량으로 피하투여하고 아세프로마진을 0.75mg/kg의 용량으로 근육 주사로 투여합니다. 활력 징후와 행동을 모니터링하면서 진정제가 효과를 발휘할 때까지 15-20분 정도 기다립니다.
   메모: Glycopyrrolate는 서맥을 예방하고 호흡기 및 위장 분비물을 줄이는 항콜린제입니다. 아세프로마진(Acepromazine)은 마취를 위한 약물 투약 역할을 하는 진정제입니다.
4. 케타민 35mg/kg과 자일라진 5mg/kg을 마취제로 피하주사합니다. 그러나 작업자가 더 경험이 많아지고 관 내 전달을 더 빠르게 수행할 수 있으므로 약물 투여량을 케타민 15mg/kg, 자일라진 3mg/kg으로 줄입니다. 이렇게 하면 마취 시간과 동물이 마취에서 회복하는 데 필요한 시간이 단축됩니다.
5. 15분마다 심박수, SPO_2, 체온, 호흡수 및 점막 색을 확인하고 문서화합니다.양쪽 눈에 눈 윤활제를 바릅니다.
   메모: 적절한 교육을 받고 해당 기관의 IACUC에서 승인한 직원만 마취를 시행하거나 모니터링해야 합니다. 수의학 마취 모니터의 사용은 활력 징후를 획득하는 데 도움이 될 수 있으므로 권장됩니다. 그러나 수의학 마취 모니터는 15분마다 동물을 수동으로 확인해야 하는 필요성을 대체하지 않습니다. 수의학 모니터의 올바른 사용에 대해서는 제조업체의 지침을 참조하십시오.
6. 부드럽게 발가락을 꼬집어 마취가 시작되었는지 확인하십시오. 토끼는 계속하기 전에 반응이 없어야 합니다.
7. 토끼의 꼬리 복부를 세 번째와 네 번째 쌍의 서혜부 젖꼭지 주변에서 조심스럽게 면도합니다.
8. 대부분의 모발을 제거한 후 면도 부위에 처방전 없이 구입할 수 있는 제모 크림을 바릅니다. 젖은 종이 타월을 따뜻한 물에 적셔 바르고 바르고 10분 후에 크림을 제거합니다.
   메모: 토끼 피부는 매우 연약하고 민감합니다. 제모 크림은 10분 이상 사용하지 않아야 합니다. 사실, 5분 후에 "테스트 장소"를 시도하고 테스트 지점에서 더 긴 시간이 필요하다고 나타내는 경우에만 더 오래 두는 것이 더 안전합니다.
9. 알코올을 적신 거즈 패드로 해당 부위를 닦아 주사 부위를 청소합니다.
10. 토끼를 재순환하는 따뜻한 물 담요와 흡수 패드가 늘어선 V자 모양의 여물통에 토끼를 눕힙니다.

2. 조영제 준비

1. 비표적 조영제 시약을 제조업체의 지침에 따라 재구성합니다. 피펫을 위아래로 부드럽게 혼합합니다.
   메모: 이 프로토콜에 사용된 조영제는 재구성 후 4 - 6시간 동안 실온에서 안정적입니다. 각 회수 사이에 바이알을 부드럽게 흔듭니다.
   참고: 필요한 용액의 양은 주입할 덕트의 수에 따라 다릅니다. 토끼는 젖꼭지당 4개의 관 구멍을 가지고 있으며 0.2mL의 용액은 성인 뉴질랜드 흰 토끼(Oryctolaguscuniculus)의 관 나무 하나를 채우기에 충분합니다. 따라서, 총 부피 0.8 mL가 하나의 유선에 전달될 수 있다.

3. 관내 전달

1. 주입할 적절한 젖꼭지를 찾으십시오. 서혜부 젖꼭지의 3^번째 및 4^번째 쌍은 동물이 등쪽에 위치할 때 쉽게 시각화될 수 있으므로 권장됩니다.
2. 22G 바늘을 사용하여 1mL Luer-lock tuberculin 주사기에 0.2mL의 멸균 0.9% 식염수를 로드합니다. 식염수가 주사기에 들어가면 22G 바늘을 적절하게 폐기하고 멸균 25게이지 바늘로 교체하십시오. 거즈 패드에 85% 이소프로필 알코올로 해당 부위를 부드럽게 닦습니다.
3. 바늘의 경사가 위로 향하고 주사기가 동물의 몸통과 평행이 된 상태에서 바늘의 경사를 젖꼭지 측면에 삽입하고 0.1-0.2mL의 식염수를 천천히 주입합니다. 이렇게 하면 관 개구부를 더 잘 시각화할
수 있습니다.
4. 0.2mL의 주사 용액을 1mL Luer-lock 투베르쿨린 주사기에 넣습니다.
5. 엄지와 검지로 젖꼭지를 부드럽게 잡고 약간 들어 올려 관내 주사를 위한 위치를 잡습니다. 착용할 수 있는 안구 확대경은 유관 개구부를 시각화하는 데 도움이 될 수 있습니다.
6. 젖꼭지의 들어 올린 위치를 유지하면서 25G의 뭉툭한 바늘을 사용하여 관심 덕트를 조심스럽게 캐뉼링합니다.
7. 삽관 후 뭉툭한 팁 주입 바늘의 허브에 있는 Luer-lock 주사기가 제자리에 고정될 때까지 부드럽게 비틀십시오.
8. 젖꼭지를 들어 올리고 용액을 천천히 주입하여 덕트 내에서 빠르게 움직이는 유체로 인한 잠재적 인 손상을 최소화하십시오. 용액을 주입 할 때 저항이 없어야합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
MicroMarker 비표적 조영제 시약	비주얼소닉	VS-11694
Luer Lock 1mL 주사기	BD (영어)	309628
글리코피롤레이트 0.2 mg/mL	웨지우드 컴파운딩 약국	글리콥 INJ013VC	유통 기한이 6개월이며 공급이 제한될 수 있습니다.
케타민 HCL 100 mg/mL	국제 동물 보건	21250699	http:// www.animalhealthinternational.com/
아세프로마진 10mg/mL	국제 동물 보건	17640541
자일라진 20mg/mL	국제 동물 보건	20101547
제모 크림	비트		민감성 피부 솔루션. 지역 소매점을 통해 구입할 수 있습니다.
무딘 팁 주입 바늘	Sai 주입 기술	나14-50	http://www.sai-infusion.com/ 컬렉션/무딘 바늘
수의학 맥박 산소 농도계	에단USA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
따뜻한 물 펌프	게이마르	TP700
따뜻한 물 담요	국제 동물 보건	21232696	Maxi-Therm Lite 워밍 패드

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