전신 면역 반응 연구를 위한 쥐 내 박테리아 지방다당류 내 주사

초록

출처: Radulovic, K. 외 장벽 돌파 후 미생물 유래 산물이 유입되는 모습을 모방하기 위해 쥐에 지폴리당을 주입하는 것. J. Vis. 경험 (2018)

이 영상은 복강 내 주사를 통해 전신 염증을 유도하기 위해 쥐에게 지다당류(LPS)를 주입하는 단계별 절차를 시연합니다.

프로토콜

동물 모델이 포함된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 심사 위원회에서 검토되었습니다.

1. 쥐에게 복강내 지다당(LPS) 주사
   1. LPS 작동 용액을 0.5mL 주사기와 30G 바늘로 층류 공기 흐름 속에 흡입하세요.
   2. 암컷 C57Bl/6마리 생쥐(6주에서 10주)를 측정하고 주입될 LPS 양을 계산합니다: 10 μL (2 μg)/g 체중.
      참고: 예를 들어, 마우스 무게가 20g이라면 20g x 10 μL = 200 μL LPS 작동 용액을 주입해야 합니다.
   3. 쥐를 부드럽지만 단호하게 다루고 한 손으로 동물을 제지하세요. 동물이 정상적으로 숨을 쉴 수 있으나 구속 중에 몸을 비틀거나 돌리지 않도록 하세요.
   4. 주사할 때 복부를 노출시키기 위해 코를 약간 바닥 쪽으로 기울이세요. 복부의 중앙선과 주사 부위를 중앙선에서 왼쪽 또는 오른쪽으로 찾으세요. 대조군 마우스에 LPS 대신 복강 내 인산염염수(PBS)를 주입하세요.
   5. 자유로운 손으로 LPS 작업 용액의 적절한 부피(1.2단계에서 계산된 부피)를 주입합니다. 바늘이 복강 안으로 들어갔는지 반드시 확인하세요. 그렇지 않으면 복부 근육층에 잘못된 주사가 발생할 수 있습니다. 하지만 바늘을 복막강 깊숙이 찌르지 말아 그 부위에 있는 내부 장기를 손상시키지 않도록 주의하세요.
   6. 한 우리마다 최대 5마리의 쥐가 있는 상태로 동물을 조심스럽게 우리로 돌려보내세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
LPS 대 장균 O111:B4	인비보젠, 캘리포니아주 샌디에이고, 미국	TLRL-EBLPS
옴니칸 50 일회용 인슐린 주사기	B. 브라운 멜순겐, 독일 멜순겐	9151125