박테리오파지 감염을 위한 토양 박테리아 배양 준비

초록

출처: Cross, T. 외, 토양 샘플 분리주에서 Arthrobacter 박테리오파지 종 분리를 위한 최적화된 농축 기법. J. Vis. 경험(2015)

이 영상은 박테리오파지 생산을 위한 박테리아 배양 준비 과정을 보여줍니다. 이 방법은 토양 박테리아를 배플링 플라스크에 접종하는 과정, 산소 공급과 흔들림을 통한 균일한 성장 촉진, 그리고 광학 밀도 측정을 이용한 세포 밀도 모니터링 과정을 다룹니다. 배양물이 최적의 성장 단계에 도달하면 효율적인 박테리오파지 생산이 가능합니다.

프로토콜

파지 분리를 위한 관절박터 세포 준비

• 배양 아르트로박터 속 KY3901 군락은 30°C에서 2-3일간 배양한 Luria Bertani(LB) 한천 플레이트 위에 스트라이크를 부착했습니다. 군집을 하나 정해 멸균 루프를 사용해 배플드 배양 플라스크에 250ml의 LB 육수에 넣고, 30°C에서 225rpm 진동하는 인큐베이터에서 배양합니다.
• 약 24시간 동안 성장하여 후기 지수/초기 정지 세포를 얻어 파지 감염 실험을 수행합니다. 박테리아 성장 상태를 면밀히 관찰하여 세포가 중후기의 정지 성장 상태에 들어가지 않도록 하세요.
  참고: 세포 성장은 파지 분리 및 정제 절차/단계에 대해 광학 밀도 OD₆₀₀₀ 0.5-0.7 사이로 이루어져야 합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
LB 브로스 파우더	피셔	BP9722-2
알갱 한천	피셔	BP1423-2
에펜도르프 튜브	피셔	05-408-129
5ml 피펫 개인	피셔	13-678-11D
50ml 원뿔형 튜브	피셔	76002844
15ml 원뿔관	피셔	76002845
10ml 피펫 개별	피셔	13-676-10J
25ml 피펫 개별	피셔	13-676-10K