방광 종양은 catheterization, 지역 소작하고, 화상 사이트에 암종 세포의 후속 유착을 통해 법으로서 방식으로 여성의 생쥐에 설립되었습니다.
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이 논문에서
요약
초록
이 간단한 절차에서 방광 종양이 catheterization의 사용, 지역 소작하고, 이후 세포 접착을 통해 여성 C57 생쥐에서 설립되었습니다. 그들의 bladders가 transurethrally catheterized과 탈진 후, 동물 다시 요도 또는 방광을 손상시키지 않고 bladders에 백금 와이어의 삽입을 허용하는 catheterized 있습니다. 카테터는 화상 상해를 만들 방광에 전류를 실시 와이어에 대한 절연체 역할을 테플론의 만들어집니다. electrocautery 단위는 세포 레이어를 멀리 레코딩 및 후속 catheterization 통해 방광에 정지에 전달됩니다 암종 세포에 대한 첨부 파일 사이트를 제공하는 전선의 노출 끝에 2.5W 전달하는 데 사용됩니다. 세포는 카테터를 제거하고 bladders가 자연스럽게 배수 수있는 후 90 분 동안 방광에 남아 있습니다. 종양의 발달은 초음파를 통해 모니터링됩니다. 특정주의는 함께 동영상 catheterization 기술로 지급됩니다.
프로토콜
1. 동물
- 여성 C57BL/6J 생쥐 (뮤스 musculus)는 전에 출하하는 공급 업체에 의해 17 murine 바이러스 전염성 ectoparasites, 기생충 endoparasites 및 항체 무료로 확인됩니다. 마우스는 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 안내에 따라 툴란 대학의 AAALAC - 공인 동물 시설에 보관되어있다. 1
- 특히, 마우스는 나무 침구 개별적으로 통풍 폴리 카보 네이트 cageswith의 microisolation 필터 정상에 보관되어 그룹 (4-5 마우스 / 케이지)입니다. 그들은 광고 libitum pelleted 쥐 음식과 수돗물을 제공하고 있습니다.
- 생쥐는 칠일은 연구의 시작하기 전에 적응을 사용할 수 있습니다.
2. 셀
- murine 전환 세포 암종 세포 라인 MB49은 방광 종양을 생산하는 데 사용됩니다.
- 세포 10% 태아 소 혈청, 100 단위 / ML 페니실린, 100 단위 / ML 스트렙토 마이신과 보충 Dulbecco의 수정 이글의 중간에있는 양식입니다.
- 문화가 37 ° C 유지 및 매체와 CO 2 2 ~....
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토론
서로 다른 결과가 예상해야하지만, 여성의 생쥐에 orthotopic 방광 종양 수립이 법으로서 방법, MB49 이외의 셀 유형에도 적용할 수 있습니다. 덜 공격적인 종양 세포를 사용하는 경우 (새로운 최적을 수립 0.5 W 단위 사용) 약간 와트 증가하면 종양 세포 부착에 더받을 수있는 영역을 낼 것이며, 얻은 세포에 대한 더 이상 방광 배양 시간은 큰 금액을 낼 것입니다 화상 사이트 (게시되지 않은 데이터)에 세포 부착. 일부 프로토콜 electrocautery, 2를 통해 10 W를 제공하는 것이 좋습니다 있지만 전력이 금액은 상한 고려되어야하고, 아마 모두 피할 수 있습니다. 다른 세포 유형을 사용하는 경우 제공 세포의 농도를 증가하면 성공의 가능성을 높일 수 있습니다.
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공개 사항
동물 실험 툴란 대학의 기관 관리 및 사용위원회에 의해 명시된 지침과 규정에 따라 수행되었다.
감사의 글
이 작품은 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 경력 수상 (CBET - 0846395)과 비교 의학의학과 툴란 대학에 의해 투자되었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| C57Bl/6J 마우스 | Jackson Laboratory | 000664 | 3-5주령 |
| 폴리카보네이트 케이지 및 환기 랙 | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
| 경목 베딩 | Harlan Laboratories | Laboratory –grade SaniChips | |
| 설치류 사료 | Harlan Laboratories | Rodent Diet 2019 | |
| 정맥 카테터 | MWI Veterinary Supply | 009231 | 24 G x ¾ in. |
| 전기소작기 | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | |
| 초음파 진단기 | Sonosite | 180 Plus (Vet) | |
| MB49 세포주 | Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | |
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | |
| 소태아혈청 | Gemini Bio Products | 100106 500A57B | |
| 페니실린-스트렙토마이신 | Invitrogen | 15140-163 |
참고문헌
- Institute of Laboratory Animal Resources. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. Washington, DC. (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zha....
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재인쇄 및 허가
