복막 지방 저장소 채취: 마우스 모델에서 복막 지방 조직의 난소암 집락화를 연구하는 기술

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 실험 연구를 위한 동물 준비

1. 동물이 새로운 주거지와 환경에 적응하고 운송 및 취급의 잠재적인 생리적 영향에서 회복할 수 있도록 합니다.
   메모: 하기 기술은 상업적으로 이용 가능한 모든 마우스 균주에 적용할 수 있습니다. 실험에 사용할 동물의 수는 연구 설계에 따라 다르며 통계학자의 자문을 받아 수행해야 합니다.

2. 복막 지방 저장소의 식별 및 격리

1. CO₂ 과다 복용 및 사망을 확인하기 위한 2차 물리적 방법을 통해 동물을 안락사시킵니다.
2. 복막 지방 저장소를 채취하는 것은 내부 장기 제거(2차 방법)에 해당하므로 복막벽을 통해 서혜부 유두에 가까운 정중선을 절개하여 내부 장기를 노출시킵니다(그림 1A).
3. Omental Fat(OM)의 경우 겸자로 복막강에서 비장을 확장하여 omental/pancreatic complex를 노출시킵니다(그림 1C). 췌장과 비장에서 모든 조직 연결을 밀접하게 다듬어 망막을 방출합니다. 남아 있는 췌장 조직이 모두 절제되었는지 확인합니다.
4. 생식선 지방(GF)의 경우 집게를 사용하여 난소를 둘러싼 생식선 지방을 들어 올리고 조직 연결부를 절단하여 절제합니다(그림 1A 오른쪽 상단).
5. 자궁 지방(UF)의 경우 집게를 사용하여 자궁 뿔을 둘러싼 자궁 지방을 들어 올리고 조직 연결을 절단하여 절제합니다(그림 1A 오른쪽 하단).
6. 장간막 지방(MF)의 경우 소장과 유문 사이의 접합부를 자릅니다. 집게를 사용하여 소장의 다른 쪽 끝을 단단히 잡고 장간막 지방에서 천천히 "벗겨냅니다". 해부 가위를 사용하여 장간막 뿌리에서 장간막 지방을 방출합니다(그림 1A 왼쪽 아래).
7. 비장포털 지방(SF)의 경우, 집게를 사용하여 비장의 말단부를 들어 올려 비장의 문턱과 췌장을 연결하는 얇은 지방 띠를 노출시킵니다. 먼저 췌장에서 비장포털 지방을 분리한 다음 비장에서 조심스럽게 절제하여 절제합니다(그림 1B).

그림 1. 주요 복막 지방 저장소의 상대적 위치와 구조. (가)복막 지방의 5가지 주요 공급원 중 4가지의 상대적 위치를 보여주는 총 해부학적 해부. omentum (OM; 윤곽선), 생식선 지방(GF), 자궁 지방(UF), 장간막 (MY), 난소 (ov), 자궁 뿔 (uh) 및 소장 (si)이 표시됩니다. (B) 집게로 비장을 들어 올려 노출된 비장포털 지방(SP; 개요). (C) 시각화를 개선하기 위해 췌장에서 자유롭게 절개된 마우스 망막. (D)절제된 복막 지방의 상대적 크기와 구조; 장간막은 장간막근에 부착된 것으로 표시됩니다. (E) 유백색 반점의 존재에 대한 복막 지방의 조직학적 평가 – (A) 지방세포, (MS) 유백색 반점.