조직 절편의 탈파라핀화 및 재수화: FFPE 조직 슬라이드에서 파라핀 왁스를 제거한 후 조직 재수화를 하는 2단계 절차

초록

출처: Sugimoto, K. et al. 위장관암에서 DNA 메틸화의 게놈 전체 분석. J. Vis. 특급 (2020년)

이 비디오에서는 위장관 종양 조직에서 얻은 FFPE 또는 포르말린 고정 파라핀 삽입 절편의 처리를 보여줍니다. 탈파라핀화(deparaffinization) 및 재수화(rehydration) 단계를 통해 후속 분석 응용 분야를 위해 조직 표본을 처리할 수 있습니다.

프로토콜

인간 참가자와 관련된 모든 절차는 인간 복지를 위한 기관, 국내 및 국제 지침에 따라 수행되었으며 지역 기관 검토 위원회의 검토를 거쳤습니다.

1. 슬라이드 세척

1. 10μm의 염색되지 않은 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 절편을 준비합니다.
2. 유리 슬라이드 홀더에 슬라이드를 놓습니다: 조직이 최소한이고 더 많은 슬라이드가 필요하지 않은 한 약 3-5개의 가장 큰 단면 슬라이드를 사용합니다.
3. 슬라이드 홀더에 자일렌을 채우고 슬라이드의 모든 조직이 물에 잠겼는지 확인합니다. 15분 동안 그대로 두십시오.
4. 15분 후 슬라이드가 떨어지지 않도록 피펫 팁으로 슬라이드를 잡고 자일렌을 붓습니다.
5. 이전과 같은 수준으로 더 많은 자일렌을 붓습니다. 15분 더 앉아 있습니다.
6. 15분 후 자일렌을 다시 붓습니다.
7. 슬라이드 홀더에 100% 에탄올(EtOH)을 채우고 슬라이드의 모든 조직이 완전히 잠겼는지 확인합니다. 3분 동안 그대로 두십시오.
8. 슬라이드를 조심스럽게 잡고 EtOH를 붓습니다. 더 많은 EtOH로 같은 수준으로 리필하십시오. 2분 동안 그대로 둡니다.
9. EtOH를 다시 붓고 슬라이드를 제거합니다. 깨끗한 종이 타월 위에 얼굴을 위로 향하게 하여 조심스럽게 말립니다. 10분 동안 그대로 두십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
크실렌	시그마-알드리치	214736
100% 에탄올	시그마-알드리치	24194