Sectioning, Staining and TEM Imaging of embedded Exosomes: A Protocol to Visualize the Structural Features Using TEM (임베디드 엑소좀의 절편, 염색 및 TEM 이미징: TEM을 사용하여 엑소좀의 구조적 특징을 시각화하는 프로토콜)

Method Article

April 30th, 2023

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 동영상은 내장된 엑소좀의 얇은 부분을 준비하는 기술에 대해 설명합니다. 이러한 단면은 투과전자현미경(TEM)을 사용하여 추가로 염색 및 이미지화하여 엑소좀의 구조적 특징을 연구할 수 있습니다.

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. 엑소좀의 절편

정제된 엑소좀 샘플(HCT116 세포의 배양 상등액에서 얻은 샘플)을 순수한 저점도 embedding 혼합물에 embedding하여 엑소좀 블록을 준비합니다.
60nm 두께의 엑소좀 블록을 초극절편을 통해 절단합니다.
20분 동안 2% 우라닐 아세테이트로 이중 염색하고 10분 동안 구연산납을
레이놀즈 납 용액의 경우 총 50mL 증류수에 질산납 1.33g과 시트르산나트륨 1.76g을 추가합니다.
80kV에서 투과 전자 현미경으로 그리드를 관찰합니다.
"Acquire"를 클릭한 다음 80kV의 전자 현미경 아래에서 CCD 카메라 시스템에서 "File" 및 "Save as"를 클릭합니다. 노출 시간에 대한 자동 설정을 따릅니다.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

선언된 이해 상충이 없습니다.

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
초마이크로 톰	라이카	증권 시세
우라닐 아세테이트	EMS (엠에스)	22400	유해 화학 물질
구연산납	EMS (엠에스)	17900
투과 전자 현미경	히타치	H7600
니켈 그리드	EMS (엠에스)	G200-니켈
구리 그리드	EMS (엠에스)	G200-CU
투과 전자 현미경	일본 전자(JEOL)	JEM2200FS

표시기 년 년

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article