출처: Jung, M. K. et al. 투과 전자 현미경에 의한 엑소좀의 샘플 준비 및 이미징. J. Vis. 특급 (2018년)
이 동영상은 내장된 엑소좀의 얇은 부분을 준비하는 기술에 대해 설명합니다. 이러한 단면은 투과전자현미경(TEM)을 사용하여 추가로 염색 및 이미지화하여 엑소좀의 구조적 특징을 연구할 수 있습니다.
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방법 논문
Sectioning, Staining and TEM Imaging of embedded Exosomes: A Protocol to Visualize the Structural Features Using TEM (임베디드 엑소좀의 절편, 염색 및 TEM 이미징: TEM을 사용하여 엑소좀의 구조적 특징을 시각화하는 프로토콜)
3.9K 조회수
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2023년 4월 30일
이 논문에서
초록
프로토콜
1. 엑소좀의 절편
- 정제된 엑소좀 샘플(HCT116 세포의 배양 상등액에서 얻은 샘플)을 순수한 저점도 embedding 혼합물에 embedding하여 엑소좀 블록을 준비합니다.
- 60nm 두께의 엑소좀 블록을 초극절편을 통해 절단합니다.
- 20분 동안 2% 우라닐 아세테이트로 이중 염색하고 10분 동안 구연산납을
레이놀즈 납 용액의 경우 총 50mL 증류수에 질산납 1.33g과 시트르산나트륨 1.76g을 추가합니다. - 80kV에서 투과 전자 현미경으로 그리드를 관찰합니다.
- "Acquire"를 클릭한 다음 80kV의 전자 현미경 아래에서 CCD 카메라 시스템에서 "File" 및 "Save as"를 클릭합니다. 노출 시간에 대한 자동 설정을 따릅니다.
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공개 사항
선언된 이해 상충이 없습니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 초마이크로 톰 | 라이카 | 증권 시세 | |
| 우라닐 아세테이트 | EMS (엠에스) | 22400 | 유해 화학 물질 |
| 구연산납 | EMS (엠에스) | 17900 | |
| 투과 전자 현미경 | 히타치 | H7600 | |
| 니켈 그리드 | EMS (엠에스) | G200-니켈 | |
| 구리 그리드 | EMS (엠에스) | G200-CU | |
| 투과 전자 현미경 | 일본 전자(JEOL) | JEM2200FS |
