쥐 수직 소매 위 절제술: 실험용 마우스 모델에서 위를 축소하는 수술 절차

초록

출처: Garibay, D., Cummings, B. P. 수직 소매 위절제술의 쥐 모델. J. Vis. 특급 (2017)

이 비디오에서는 실험용 마우스 모델에서 수직 소매 위 절제술 절차가 수행됩니다. 이 절차는 더 큰 곡률을 따라 위의 상당 부분을 제거하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수직 소매 위절제술 및 가짜 절차

1. 수술 당일, 쥐의 체중을 측정하여 기준 체중 측정을 얻습니다.
2. 수술실에 마취 시스템, 온수조 및 발열 패드를 갖추십시오. 수조를 37°C로 설정하고 관개를 위해 0.9% 식염수를 데우는 데 사용합니다. 70% 에탄올로 수술 부위를 청소하고 멸균 기술을 사용하여 오토클레이브 수술 팩과 도구를 엽니다.
   메모: 발열 패드는 수술 및 마취 후 회복 중에 동물을 따뜻하게 유지하는 데 사용됩니다.
3. 유도 챔버를 사용하여 5% 이소플루란과 1L/min의 O₂ 유속으로 마우스를 마취합니다. 발가락 꼬집기를 수행하여 마우스가 적절한 마취 평면에 있는지 확인합니다. 일관된 마취 평면이 달성되면 1-3% 이소플루란과 0.6L/min의 O₂ 유속으로 마우스를 유지합니다.
4. 마우스가 마취되면 수술 중에 마우스가 촉촉하게 유지되도록 눈에 안연고(재료 표 참조)를 바르십시오. 이때 멜록시캄(피하 2mg/kg)과 같은 진통제도 투여합니다. 배꼽에서 겨드랑이까지 털을 자르고 피부를 부드럽게 눌러 긴장을 줍니다.
   1. 쥐의 피부는 얇고 섬세하므로 털을 자를 때 피부 병변이 생기지 않도록 주의하세요. 포비돈 요오드와 알코올로 피부를 청소하십시오.
   2. 멸균 장갑을 착용하고 멸균 수술 부위와 기구를 준비합니다. 멸균 기술을 사용하여 나머지 절차를 수행합니다. 마우스의 양쪽에 멸균 수술용 드레이프를 배치하여 멸균 수술 영역을 준비합니다. 오토클레이브 주석 호일을 사용하여 마우스용 수술용 드레이프를 만듭니다.
   3. 마우스의 복부에 접근할 수 있도록 은박지에 작은 구멍을 자릅니다.
5. 홍채 가위를 사용하여 복부 중간(배꼽)에서 xiphoid 연골 수준까지 피부를 절개합니다. linea alba를 식별하고 홍채 가위를 사용하여 linea alba를 따라 체벽을 자릅니다. CTA를 사용하여 복부에서 위를 부드럽게 들어 올린 다음 위의 더 큰 곡률에서 더 큰 망막을 퉁명스럽게 절개합니다.
6. 위의 안저와 비장 사이를 달리는 짧은 위 동맥을 7-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사를 사용하여 두 개의 결찰을 배치합니다. 스프링 가위를 사용하여 두 합자 사이를 자릅니다. 동맥이 절제되면 복강에서 위를 완전히 외부로 배출합니다. 거즈를 위 아래에 놓고 식염수를 적셔 조직을 촉촉하게 유지합니다.
7. VSG 시술의 경우, 각 매듭에 대해 3회 던지기를 사용하여 테이퍼 바늘로 7-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사로 위 동맥과 정맥의 돌출된 가지를 접합합니다. 합자를 의도한 transection의 바로 아래(즉, 위의 더 작은 곡률 쪽으로)에 놓습니다.
   메모: 의도된 절편선은 위의 ~2mm(위의 더 큰 곡률을 향함을 의미), 위의 심장 노치, 마고 필카투스(margo pilcatus) 아래 최소 2mm에서 시작하여 췌장의 우엽 근위부 끝까지 확장됩니다. 일반적으로 위벽당 4개의 혈관이 결찰되어야 합니다. 그러나 이것은 마우스마다 다를 수 있습니다.
   1. 위 절제술 중 위 내용물이 유출되는 것을 방지하기 위해 테이퍼 바늘이 있는 6-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사를 사용하여 의도된 절개 선 바로 아래에 양쪽 위벽을 통과하는 간단한 연속 봉합사 라인을 배치합니다. 외과 의사의 식도 오른쪽과 마고 필카투스 아래에서 봉합선을 시작하여 췌장 바로 위에서 끝납니다.
   2. 끝이 얇은 지혈기를 봉합선 위에 놓고 스프링 가위를 사용하여 봉합선과 지혈선 사이를 자릅니다. 멸균 수술 부위에서 transection된 위 조직을 제거합니다. CTA를 사용하여 위에서 혈액과 소화를 청소하십시오.
   3. 간단한 불연속 패턴을 사용하여 테이퍼 바늘로 6-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사를 사용하여 위벽의 부착을 강화합니다.
      메모: 단순한 불연속 봉합 패턴은 단순한 연속 봉합 패턴보다 더 안전한 봉합을 제공하기 때문에 권장됩니다.
   4. 조직을 촉촉하고 깨끗하게 유지하기 위해 절차 전반에 걸쳐 위 잔여물을 식염수로 씻어냅니다. 20mL 주사기에 부착된 20G 가비지 바늘을 사용하여 식염수로 위 세척을 수행합니다. 이 크기를 사용하여 과도한 압력으로 인한 위 조직 손상 또는 일반 뾰족한 바늘 사용으로 인한 우발적인 위 조직 손상의 위험 없이 적절한 압력이 제공되도록 하십시오.
   5. 위를 단단히 닫기 위해 최소 20노트를 사용하십시오. 식도 쪽을 따라 닫는 데 주의를 기울이십시오. 이 쪽은 접근하기가 더 어렵기 때문에 종종 탈락 부위가 되기 때문입니다.
   6. CTA로 배를 부드럽게 눌러 누출이 없는지 확인하십시오. 누출이 확인되면 누출 부위에 간단한 불연속 매듭을 추가로 놓은 다음 누출 테스트를 다시 수행합니다. 누출이 감지되지 않을 때까지 누출 테스트.
   7. 감염성 미립자 물질이 남지 않았는지 확인하기 위해 최소 60mL의 식염수를 사용하여 위를 마지막으로 철저히 세척합니다.
8. CTA를 사용하여 위를 간 아래의 복강에 다시 놓습니다. 복강의 등쪽을 따라 CTA를 배치하여 모든 과도한 체액을 흡수합니다. 뭉툭한 18G 바늘을 사용하여 항생제(0.5mL LRS +/- 20mg/kg Enrofloxacin)를 봉합하기 직전에 복강에 직접 주입합니다.
   메모: 이는 수술 중 경험하는 체액 손실을 대체하고 회복을 돕기 위해 수술 부위에 항생제를 직접 도포할 수 있는 방법을 제공합니다.
9. 6-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사를 사용하여 테이퍼 바늘로 간단한 불연속 패턴으로 복부 근육층을 닫습니다. 그런 다음 6-0 모노필라멘트 흡수성 봉합사로 간단한 연속 패턴으로 피부층을 닫습니다.
10. 피부에 조직 접착제를 바르고 봉합선 위로 피부를 접어 봉합사를 묻어 쥐가 수술 후 상처 봉합을 방해하지 않도록 합니다.
11. 이소플루란을 끄고 마우스가 10-15분 동안 가열 패드에서 회복되도록 한 후 홈 케이지로 되돌립니다. 동물이 의식을 되찾고 움직일 수 있을 때까지 동물을 방치하지 마십시오.
12. 수술 후 완전히 회복될 때까지 동물을 단독으로 수용하십시오.
    메모: 연구 전반에 걸쳐 정확한 음식 섭취량 측정을 얻어야 하는 경우 마우스는 연구 기간 동안 계속 단독으로 수용되어야 합니다. 가정용 케이지 침구를 먹음으로써 이물질이 폐색될 위험이 있습니다. 동물은 풍부함을 제공하기 위한 둥지 재료를 제외하고는 침구가 없는 우리에 수용해야 합니다(재료 표 참조).

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
6-0 봉합사	에티콘	Z432	모노필라멘트 흡수성/테이퍼
7-0 봉합사	코비디엔	8866127-01	모노필라멘트 흡수성/테이퍼
면봉	피셔브랜드	Tel.: 23-400-118	작다
면봉	피셔브랜드	Tel.: 233-400-101	큰
박	다양한
수술 드레이프	다양한
0.9% 식염수	다양한
마이크로니들 드라이버	정밀 과학 도구	12075-14
봄 가위	정밀 과학 도구	15396-00
알코올	다양한
눈 연고	Paralube®수의사 연고	17033-211-38
멜록시캠(메타캠)	베링거인겔하임	141-213	5 mg/ml
얇은 팁 지혈기	정밀 과학 도구	13021-12
20mL 주사기	다양한
엔로플록사신	베이트릴	제08713254-186599	22.7 마그네슘 / ml

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