쥐의 Intracerebroventricular Injection: 마우스 뇌의 뇌실에 약물을 전달하기 위한 Ommaya 매개 직접 약물 투여 방법

초록

출처: Law, V. et al. 연수막 질환의 직접 표적 치료를 연구하기 위한 쥐 옴마야 이종 이식 모델. J. Vis. 특급. (2021년)

이 비디오는 마우스 모델에서 옴마야 매개 뇌실 내 주사를 보여줍니다. 이 방법은 잠재적인 약물 후보의 국소 전달을 가능하게 하고 혈액-뇌 장벽을 회피합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. Murine Ommaya 조립 및 이식

1. 스테이션의 준비
   1. 스테이션 표면을 소독하십시오. 표면에 파란색 덮개를 씌우고 그림 1에 표시된 모든 멸균 도구와 소모품을 준비하십시오.
2. 수술 전 절차
   1. 진통제(Bup-SR)를 도포하고 무균 수술 환경을 유지합니다.
3. Murine Ommaya의 외과적 이식
   1. 25G(외경 0.51mm) 소형 주입 포트와 1mm 스페이서 디스크를 사용하여 Murine Ommaya 주입 장치를 조립합니다. 시아노아크릴레이트 멸균 접착제를 사용하여 약 2.5mm의 금속 캐뉼라가 오른쪽 대뇌 반구로 침투하도록 합니다(그림 2A–C).
      메모: 이 실험실에서는 MRI 호환 Mouse Ommaya 프로토타입이 개발되었으며, 이미 두 부품(소형 주입구 및 스페이서)이 단일 장치로 3D 프린팅되어 있습니다(그림 2D....

결과

그림 1: 마우스에 Murine Ommaya 이식을 수행하기 위한 워크스테이션 설정의 예. (1) 가스 마취기/기화기. (2) 입체 스탠드를 덮고있는 멸균 된 파란색 종이 드레이프. (3) 입체 장치(스탠드/스테이지, 이어바, 노즈 콘). (4) 마이크로 드릴. (5) 빛으로 돋보기. (6) 멸균 식염수 헹굼 용기가 있는 멸균 면팁 어플리케이터 스틱. (7) 과산화수소. (8) 비드 살균기.

그림 2: Murine Ommaya 장치의 이식.(A) 두개골의 브레그마 위치를 가리키는 화살표와 마이크로 드릴을 사용하여 브레그마에서 두개골(후방 0.5mm/측면 1.1mm)에 버 구멍을 뚫는 대략적인 거리. (B) Murine O.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
1mm 스페이서 디스크	알제, 듀렉트 코퍼레이션	#0008670	스페이서 디스크만 해당
4-0 에틸론 나일론 봉합사	모든 공급업체
자동 주사기 펌프	Harvard Syringe Pumps(또는 모든 공급업체)	#70-4505	펌프 11 엘리트
비드 살균기	Braintree Scientific Inc.(또는 모든 공급업체)	#GER 5287-120V	저미네이터 500
부프레노르핀 서방형(Bup-SR)	주팜		DEA 통제
시아노아크릴레이트 멸균 접착제	모든 공급업체
가스 흡입 아네스테시아 시스템	베트이핍	#901812	COMPAC5
Hamilton 마이크로리터 주사기	해밀턴		10, 25, 50 및 100 μL; 수조 마그나 주입을 위한 30G
과산화수소	모든 공급업체
IVIS 200 이미징 시스템	캘리퍼 생명 과학
빛을 사용한 돋보기	모든 공급업체
마이크로드릴	스톨팅(또는 모든 공급업체)	#51555M
MRI 영상	브루커	BioSpec 시리즈	선택적
Murine Ommaya (MRI 호환) 프로토 타입	인스텍 연구소, Inc.	#VAB620-25MRI-3.3
PinPort 인젝터	인스텍 연구소, Inc.	#PNP3M-50
핀포트	인스텍 연구소, Inc.	#1-PNP3F28-50
설치류 수술 기구(가위, 집게)	Roboz 수술 기구(또는 모든 공급업체)
입체택시 장치	스톨팅(또는 모든 공급업체)	#51730M
멸균 블루 페이퍼/드레이프 커버	모든 공급업체
멸균 코튼 스틱	모든 공급업체