출처: Haumann, R. et al. 설치류에서 혈액-뇌 장벽을 열기 위한 고처리량 이미지 유도 정위 신경 항법 및 집속 초음파 시스템. J. Vis. 특급 (2020년)
이 비디오는 마이크로 버블 매개 집속 초음파(FUS)를 사용하여 일시적인 개구부를 만들어 혈액뇌장벽(BBB)을 일시적으로 파괴하는 방법을 설명합니다. 이러한 일시적인 국소 BBB 개구부는 결국 더 큰 크기의 약물 분자를 뇌 실질로 직접 전달하는 데 사용될 수 있습니다.
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방법 논문
Focus Ultrasound based microbubble mediated Blood-Brain Barrier Opening: A technique to create localized transient openings in mouse by sosoporation(초음파 기반 마이크로버블 매개 혈액-뇌 장벽 개구부: 초음파 처리에 의한 마우스의 혈액-뇌 장벽에 국부적인 일시적인 개구부를 생성하는 기술)
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2025년 7월 8일
이 논문에서
초록
프로토콜
인간 참가자와 관련된 모든 절차는 인간 복지를 위한 기관, 국내 및 국제 지침에 따라 수행되었으며 지역 기관 검토 위원회의 검토를 거쳤습니다.
1. 집속 초음파 시스템
참고: 설명된 설정은 상업적으로 이용 가능한 구성 요소를 기반으로 하는 사내 BBB 중단 시스템이며 3D 프린팅 맞춤형 원뿔과 분리 가능한 정위 플랫폼을 포함합니다. 이 시스템은 모듈식으로 설계되어 사용 가능한 장비 및 특정 용도에 따라 쉽게 수정할 수 있습니다. 이 프로토콜은 마우스 뇌의 폰틴 영역에서 더 넓은 영역의 초음파 처리 절차를 설명합니다. 목표 위치를 조정함으로써 뇌의 다른 부분을 목표로 삼을 수 있습니다. 본 연구에서는 초점 거리가 75mm, 조리개가 60mm, 초점 영역이 1.5 x 1.5 x 5mm(피크 압력의 FWHM)인 1MHz 단일 소자 트랜스듀서를 사용했습니다. 변환기의 초점면은 이어바와 교차하는 수평면에서 동물의 두개골을 통해 위치합니다.
- 설치류의 BBB 개구부에 적합한 변환기를 선택하십시오.
메모: microbubbles....
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결과
그림 1: 집속 초음파 설정. (A) 집속 초음파 설정의 개략도. (B) 집속 초음파 설정의 그림. 이 시스템은 자동 3D 포지셔닝을 위해 두 번째 2D 스테이지 위의 1D 선형 스테이지에 하향식으로 장착된 트랜스듀서로 구성됩니다. 변환기는 물이 채워진 빔 콘으로 제작되었으며 바닥은 음향적으로 투명한 마일라 멤브레인으로 닫혀 있어 소리를 동물의 두개골로 전달합니다. 트랜스듀서는 전력 증폭기에 연결되며, 증폭기는 신호 생성을 위해 AWG(임의 파형 발생기)에 차례로 연결됩니다. 캐비테이션 감지를 위해 저잡음 전압 증폭기와 함께 분리 가능한 수중 청음기가 사용됩니다. 수중청음기는 후두골 바로 근처에 배치됩니다. 외부 수중청음기는 2mm의 활성 표면을 가지고 있으며.......
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공개 사항
선언된 이해 상충이 없습니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 1mL 루어락 주사기 | 벡턴 디킨슨(Becton Dickinson) | 309628 | 플라스티팍 |
| 19G 바늘 | 아가니 테루모 | 8AN1938R1 | |
| 23 G바늘 | 아가니 테루모 | 8AN2316R1 | |
| 3M Transpore 수술용 테이프 | 과학을 생명에 적용하다 | 7000032707 | 또는 이와 유사한 |
| 임의 파형 발생기 | 시글렌트 | SDG1025, 25mHz, 125MSa/초 | |
| 자동화된 스테레오택트 | 자체 제작 | 모든 요소가 포함된 Stereotact는 사내에서 제작되었습니다 | |
| 브루커 인비보(In-Vivo) 익스트림 | 브루커 | 소프트웨어 포함 | |
| 완충된 NaCl 용액 | B. 브라운 멜숭겐 AG | 220/12257974/110 | |
| 부프레노르핀 염산염 | 인디비오르 영국 제한 | 0.324의 mg의 | |
| 케이지 농축: 종이 펄프 스마트 홈 | 바이오 서비스 | ||
| 카본 필터 | 빅포드 | NC0111395 | 옴니콘 f/air |
| 세라믹 숟가락 | |||
| 면봉 | |||
| D-루시페린, 칼륨염 | 골드 바이오테크놀러지 | 행운-1 | |
| 에탄올 | VUmc 약국 | 70% | |
| 에반스 블루 | 시그마 알드리치 | E2129 | |
| 프레제니우스 NaCl 0.9% | 프레제니우스 카비 | Nacl 0.9 %, 1000 mL | |
| 히스토아크릴(Histoacryl) | 브라운 서지컬 | 히스토아크릴릴 0.5 mL | |
| 수중청음기 | 정밀 음향 | ||
| 인슐린 주사기 | 벡턴 디킨슨(Becton Dickinson) | 324825/324826 | 0.5 mL 및 0.3 mL |
| 이소플루란 | 테바 파마케미 BV | 8711218013196 | 250 밀리리터 |
| 케타민 | 알파산 | 10 %, 10 mL | |
| 마우스 사료: Teklad global 18% 단백질 설치류 식단 | 엔비고 | 2918-11416엠 | |
| 네오플론 카테터 | 벡턴 디킨슨(Becton Dickinson) | 391349 | 26 GA 0.6 x 19 밀리미터 |
| 오실로스코프 | 키사이트 기술 | Infiniivision DSOX024A | |
| 플라스틱 튜브 | 그라이너 바이오 원 | 210261 | 50 밀리리터 |
| 파워 앰프 | 전자 및 혁신 회사 | 210리터 | 모델 210L |
| 프리앰프 DC 커플러 | 정밀 음향 | 일련 번호: DCPS94 | |
| 가위 | 시그마 알드리치 | S3146-1개 | 또는 이와 유사한 |
| 세다진 | AST 파마 | 2% | |
| SonoVue 마이크로버블 | 브라코 | 8 μl/mL | |
| 멸균수 | 프레제니우스 카비 | 1000 밀리리터 | |
| 주사기 | 다양한 주사기를 사용할 수 있습니다. | ||
| 템게식 | 인디비오르 영국 제한 | 0.3 mg/mL | |
| 변환기 | 정밀 음향 | 1 메가헤르츠 | |
| 핀셋 | 시그마 알드리치 | F4142-1개 | 또는 이와 유사한 |
| 초음파 젤 | 파커 연구소 Inc. | 01-02 | 아쿠아소닉 100 |
| 비디식 젤 | 바우쉬 + 롬 | 10 지 |
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