성체 쥐 모델에서 구개 조직 해부 : 성체 마우스의 구강에서 경구개 및 연구개를 채취하는 수술 절차

초록

출처: Xuan Ngo, Y. et al. Isolation and Culture of Primary Oral Keratinocytes from the Adult Mouse Palate. J. Vis. 특급.(2021년)

이 비디오는 쥐 모델에서 구개 조직을 해부하는 수술 절차를 보여줍니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 성체 마우스의 구개 조직 해부

1. 동물 복지와 관련된 시설의 규정에 따라 성인 C57BL/6J 마우스(수컷 또는 암컷)를 경추 탈구로 희생시킵니다.
   1. 면도기로 입 주위의 털을 제거합니다. 가위를 사용하여 뺨에서 턱 쪽으로 양쪽을 자릅니다.
      메모: 희생 전에 마우스를 마취해야 합니다. 메데토미딘(medetomidine), 미다졸람(midazolam) 및 부토르파놀(butorphanol)의 마취 혼합물이 사용됩니다(재료 표 참조).
2. 집게를 사용하여 입을 크게 벌리고 면봉으로 혈액을 흡수합니다. 입천장을 소독하려면 포비돈 요오드 10%가 함유된 면봉으로 입 안을 닦습니다.
3. 쥐의 입천장을 채취하려면 먼저 수술용 메스 날을 사용하여 상악 치아의 입천장 쪽을 따라 전체 두께의 가장자리 절개를 만듭니다. 그런 다음 raspatorium.
   를 사용하여 입천장 전체를 조심스럽게 해부합니다. 메모: 라스파토리움(raspatorium)은 점막피판(mucoperiosteal flap)을 올리는 데 사용되는 도구입니다(재료 표 참조)(그림 1B).
4. 4mL의 완전한 배지 + 항생제-항진균 용액 4개가 들어 있는 15mL 튜브로 구개 조직을 빠르게 옮깁니다. 부화 준비가 될 때까지 조직을 얼음 위에 두십시오.
   메모: 여러 생쥐에서 채취하기 위해 입천장 조직을 최대 4시간 동안 얼음 위에 보관할 수 있습니다.

결과

그림 1: 마우스 구강 각질세포의 박리 절차 및 분리에 대한 개요.(A) 마우스 구강(mouse oral cavity)의 개략도. (B) 입천장을 해부하고 마우스 구강 각질세포를 분리하는 데 사용되는 기구. (C) 마우스 입천장의 명시야 이미지. 눈금자: 100 μm. (D) 프로토콜 요약.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
아이리스 가위	무로마치 기카이	14090-09
메데토미딘	일본 젠야쿠 공업		도미토르
미다졸람	아스텔라스 파마		도미쿰
No.15 일회용 메스	깃털	219AABZX00136000
부토르파놀	메이지 제과 제약		베토르팔레
반곡선 겸자	BRC 바이오연구소	프리13-3376
포비돈-요오드	Y's 광장	872612
라스파토리움 #14	하나로	8-4599-01
가는 집게	BRC 바이오연구소	프리13-3374
항생제-항진균제 100x	지브코	15240062
15 mL 멸균 원뿔형 튜브	송골매	352096
면	하나로	Tel.: 63-1452-97
EpiLife 정의 성장 보충제(EDGS)	지브코	시즌 0120

년