고주파 초음파 기반 임신 초기 특성화: 임신한 쥐 모델에서 배아 착상 및 임신 진행을 연구하는 기술

초록

출처: Peavey, M. C. et al. 마우스의 초기 임신 특성화를 위한 3차원 고주파 초음파의 새로운 사용. J. Vis. 특급 (2017년)

이 비디오에서는 임신한 쥐 모델에서 배아 착상 부위를 이미지화하는 고주파 초음파를 시연합니다. 이 이미징 기술은 생존 가능한 임신을 성공적으로 감지하고 쥐 임신 초기의 배아 착상 부위를 특성화합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 임신한 마우스 이미징

1. 모니터링 플랫폼에 누운 마우스를 놓습니다. 마우스는 콧방울을 통해 이소플루란 마취제(1.5–2.5%)와 산소(1L/분)를 지속적으로 받습니다. 플랫폼의 심박수 모니터링 패드에 모든 발을 부드럽게 테이프로 붙입니다.
   1. 복부에 초음파 투과 젤 1-2mL를 바릅니다.
2. 수동 모터 스테이지를 사용하여 초음파 프로브를 하복부에 배치합니다.
   1. 방광을 찾으면 질 입구에 두족이 있는 액체로 가득 찬 다크서클처럼 보여야 합니다.
   2. 방광을 찾으면 프로브를 두부로 매우 천천히 움직여 임신한 자궁을 시각화하며, 자궁은 임신 부위에 둥근 영역이 있는 원통형 모양으로 나타나야 합니다. 이것은 사슬에 걸린 진주처럼 보인다고 설명할 수 있습니다.
   3. 임신한 자궁이 확인되면 2D 이미징을 시작합니다.

2. 2D 초음파 이미징(그림 1)

1. 임신한 자궁이 확인되면 방광에서 가장 가까운 임신 부위부터 시작하여 두족을 천천히 순차적으로 움직여 임신 부위의 수와 위치를 확인합니다.
2. 신장, 비장 또는 간이 시각화되면 사용자가 두부를 너무 멀리 갔으므로 프로브를 꼬리에 더 가까이(방광에 더 가까이) 재배치합니다.
3. 같은 방식으로 반대쪽 자궁 뿔을 이미지화합니다.
4. 초음파 프레임이 착상/임신 부위 중앙에 있을 때 이미지를 고정하여 나중에 분석 및 측정하기 위해 저장합니다.
   참고: 이미지를 고정하고 나중에 분석하기 위해 저장하는 데 1초도 걸리지 않습니다.
5. 먼저 "측정" 도구를 수동으로 클릭한 다음 한 이식 부위의 위치를 클릭하여 hyperechoic decidualization 반응을 마커로 사용하여 이식 거리를 측정합니다. 그런 다음 커서를 다음 이식 부위로 드래그하고 클릭하여 컴퓨터가 자동으로 거리를 보고하는 선을 그립니다. 그러면 소프트웨어가 수동 측정이 무엇인지 보고합니다. 이 단계는 컴퓨터화되지 않았지만 사용자가 탈이중화된 사이트 사이에 선을 그려 데시듀탈화된 사이트 사이의 거리를 표시하며, 이는 프로그램이 측정을 제공합니다.
6. 착상 크기, 임신낭 크기 및 태아 극 크기를 측정합니다.

결과

그림 1: 착상 부위 발달에 대한 고주파 초음파 검출 및 임신 기간 동안의 태아 성장 모니터링.그림 1A에서 볼 수 있듯이 5.5 dpc에서 더 가벼운 hyperechoic decidualized endometrium (D)을 사용하면 착상 부위의 수와 간격을 정량화할 수 있습니다. 그림 1B에서 볼 수 있듯이, 다른 자궁뿔의 탈이중화 부위(D)는 자궁뿔(U)에 의해 결합됩니다. 7.5 d.p.c.쯤 되면 더 어두운 저반향낭(GS)과 태아극(F)을 쉽게 식별할 수 있습니다 그림 1C.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
VisualSonics Vevo 2100 초음파 이미징 플랫폼/기계	비주얼소닉스, Inc.	VS-11945
Vevo 이미징 스테이션	비주얼소닉스, Inc.	SA-11982
Aquasonic 100 초음파 트랜스미션 젤	파커	#SKU PLI 01-08
이소플루란(IsoThesia) 100mL 병	헨리 셰인	#의 29404
PuraLubenAnimal 안과 연고	데크라	#12920060