Langendorff 역행성 심장 관류: 고립된 쥐 심장을 관류하는 생체 외 기술

초록

출처: Wu, K. et al. 성체 마우스에서 심방 및 심실 근세포의 동시 격리를 위한 Langendorff 방법의 수정. J. Vis. 특급 (2021년)

이 비디오에서는 고립된 쥐 심장의 Langendorff 역행 관류를 수행합니다. 시술 중, 상행 대동맥에 삽입된 캐뉼라를 사용하여 관상 동맥을 통해 관류 용액으로 역행하여 심장의 심장 활동을 유지합니다. 이 모델은 심장의 심장 병리 생리학을 연구하는 데 사용됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 용액 및 관류 장치 준비

1. 일정한 흐름의 Langendorff 장치(시판식 또는 자체 제작)를 조립합니다. 그림 1은 간단한 회로도를 제공합니다.
2. 표 1 및 표 2에 제공된 시약에 따라 용액을 준비합니다.
3. 순환 수조를 켜고 적절한 입력 온도(실험실에서는 42.7°C)를 조정하여 캐뉼라에서 관류수 순환 시스템의 유출이 37°C에 도달하도록 합니다.
4. 탈이온수를 순환시켜 관류 시스템을 청소합니다. 멸균 상태가 필요한 경우 관류 시스템을 통해 75% 에탄올을 15분 동안 실행한 다음 탈이온수를 실행합니다(심장에 대한 알코올 독성 영향을 피하기 위해 최소 10주기).
5. 관류액 순환 시스템의 한 주기에 대한 시간과 부피를 측정하여 다음 관류 단계에서 몇 밀리리터의 산소가 공급된 Tyrode 용액을 로드해야 하는지 결정합니다.
6. 원하는 방법으로 모든 수술 도구를 살균하십시오.
7. 관류액 관류 시스템의 유....

결과

그림 1. 조립된 수정된 Langendorff 시스템의 개략도.이 시스템은 사용자에게 경제적이고 휴대가 간편합니다. 플라스틱 튜브는 물(내경, 8mm)과 관류액(내경, 1.5mm)의 두 부분으로 구성되어 있으며, 그 중 말단 끝은 루어 잠금 장치가 있는 PE 의료용 3방향 마개에 연결됩니다. 물이 들어 있고 고무 마개가 있는 유리병은 열교환기 형태입니다. 관류액은 연동 펌프에 의해 열교환기의 플라스틱 튜브로 펌핑되고 캐뉼라에 연결된 3방향 마개에서 나옵니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
2,3-부탄디온 단산소(BDM)	시그마-알드리치	31550
염화칼슘2	시그마-알드리치	C4901
포도당	시그마-알드리치	G7528 (영문
헤페스	시그마-알드리치	H3375 (영문
케이클	시그마-알드리치	P9333
KH2사서함4	시그마-알드리치	P5655
KHCO3	시그마-알드리치	237205
재질 보기 MgCl2	시그마-알드리치	M8266
재질 보기 MgSO4	시그마-알드리치	M7506
나2HPO4	시그마-알드리치	S7907
염화나트륨	시그마-알드리치	S7653
나HCO3	시그마-알드리치	S5761
연동 펌프	롱거펌프	BT100-2J
황소자리	시그마-알드리치	T0625
수조	줄라보	에드 (v.2)

년 ) ) (영문) (영문) (한국어판)