태아 쥐 배아 채취: 임신한 쥐에서 배아를 채취하는 절차

초록

출처: Yun, K. 메틸렌 블루 염료 주입에 의한 요로 접합 폐쇄 결함 평가. J. Vis. 특급(2017년)

이 비디오는 임신한 쥐에서 배아를 채취하는 방법을 보여줍니다. 회수된 주산기 배아는 포유류 발달을 연구하기 위한 모델 시스템으로 사용할 수 있습니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 태아 배아 해부

1. 해부 가위와 집게를 70% 에탄올로 세척합니다.
2. E18.5 또는 E19.5에서 주산기 배아를 채취하려면 먼저 CO₂ 흡입을 사용하여 임신한 마우스를 안락사시킨 다음 윤리 지침에 따라 자궁경부 탈구를 수행합니다.
   메모: 임신한 암컷 쥐는 보통 E18.5부터 출산하지만, 신장이 클수록 조작하기가 더 쉽습니다. 따라서 출생 시기가 가까워진 E19.5의 신장은 이 분석을 수행하기가 더 쉽습니다. 그러나 양측 요로 폐색이 있는 새끼는 출생 후 죽습니다. 실험용 마우스의 특성에 따라 적절한 채취일/시간을 경험적으로 결정해야 합니다.
3. 복부 복부 표면에 70% 에탄올을 분사한 다음 해부 가위와 집게를 사용하여 복강을 복부로 엽니다.
4. 자궁 전체를 들어 올려 자궁 뿔 끝을 해부 가위로 잘라 몸에서 분리합니다.
5. 페트리 접시에 1x PBS로 자궁 전체를 헹굽니다.
6. 해부 가위로 자궁을 분절하고 해부 집게로 태반 decidua를 제거하여 난황낭에 담긴 배아를 노출시킵니다.
7. 먼저 난황낭을 제거한 다음 해부 겸자로 양막을 제거하여 주산기 배아를 해방시킵니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
섬세한 작동 가위	Roboz 수술 기구 Co.	RS-6702
마이크로 해부 겸자	Roboz 수술 기구 Co.	RS-5135
듀몬트 핀셋; 패턴 #5	Roboz 수술 기구 Co.	RS-5045
Quality Biological Inc. 일반 식염수 - 500ML	피셔사이언티픽	50-983-204