방법 논문

마우스 전방 난모세포 분리: 갓 수확한 마우스 난소에서 전방 난모세포를 분리하는 방법

2025년 7월 8일

이 논문에서

초록

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출처: Monti, M. et al. 핵 염색질 조직을 기반으로 한 마우스 전방 난모세포의 분리 및 특성화. J. Vis. 특급 (2016년)

이 비디오는 갓 채취한 쥐 난소에서 전방 난모세포를 분리하는 방법을 설명합니다. 이러한 전방 난모세포는 추가 특성화 및 발달 연구에 사용할 수 있습니다.

프로토콜

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동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 동물

  1. 3주에서 6주 된 성인 암컷 쥐를 온도와 습도가 조절된 방에 보관하십시오(12L:12D의 위상 및 임시로 먹이기).
  2. 생쥐에게 2.5IU의 임산부 혈청 성선 자극 호르몬(PMSG)을 복강내 주사하여 난포 자극 호르몬(FSH)의 효과를 모방하여 여포 성장을 자극합니다. 48시간 후 전방 난모세포 수집을 위해 난소를 분리합니다. 이전에 PMSG를 주입한 암컷 마우스를 표준 지침에 따라 안락사시킵니다.
  3. 체강에서 난소를 빠르게 제거하고 후속 난모세포 분리를 위해 M2 배지가 포함된 페트리 접시에 넣습니다(섹션 3 참조).
    1. 복벽을 덮고 있는 피부를 절개한 후 멸균 해부 가위를 사용하여 복막을 절개합니다. 절개 부위를 열어 복부를 드러내고, 멸균 핀셋을 사용하여 한쪽의 장을 움직여 방광에서 시작하여 V자 모양을 형성하여 자궁관을 국소화합니다.
    2. 신장 아래에 위치한 난소를 관찰합니다. 멸균 핀셋으로 각 튜브를 잡고 난소 아래쪽을 작게 절개하여 풀어줍니다. 사전 평형 ....

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결과

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그림 1. 유리 파스퇴르 피펫과 분젠 버너를 사용한 입 피펫 준비.

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그림 2. 예열 및 평형 M2 배지로 채워진 페트리 접시의 온전한 난소.

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공개 사항

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선언된 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
증권 시세시그마G4527
엠브리오맥스 M2밀리포어MR-015-PD
미네랄 오일시그마M8410
세포 배양 접시 35mm x 10mm코 닝430165
μ-접시 35mm, 높은 유리 바닥이비디81158
피펫 파스퇴르 붕규산코 닝7095D-9
교정된 micropillary 피펫을 위한 Aspirator tube 어셈블리시그마A5177
표시기

재인쇄 및 허가

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태그

M2

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