쥐꼬리 림프부종 모델: 쥐꼬리에서 지속적인 림프부종을 생성하는 생체 내 기술

초록

출처: Hassanein, AH et al., 쥐 꼬리 림프부종 모델. J. Vis. 특급 (2021).

이 비디오는 쥐 꼬리 림프 부종을 생성하는 생체 내 기술에 대해 설명합니다. 이 모델은 림프부종에 대한 메커니즘과 치료법을 연구하는 데 적용됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 마우스 꼬리 림프관의 외과적 파괴

1. 성별 분포가 같은 8주 된 C57BL/6 마우스를 사용합니다.
2. 100% 산소에 3-4% 이소플루란이 함유된 유도 챔버에 마우스를 전신 마취 하에 놓고 절차 중에 1-3%의 유지 진정제를 투여합니다.
3. 통증 조절을 위해 0.5mg/kg 서방형(SR) 부프레노르핀을 피하로 투여합니다.
   메모: 투여 후 추가 진통제 투여: 최소 48시간 동안 24시간마다 한 번, 절개 후 또는 절개 부위를 봉합하기 전에 부피바카인을 한 번 투여하고 피부 가장자리에 떨어뜨려 도포합니다(최대 4 – 6시간 지속).
4. 마우스를 등쪽에 배치하고 꼬리에 70% 이소프로필 알코올을 준비합니다.
5. 캘리퍼를 사용하여 꼬리 바닥에서 20mm부터 시작하여 5mm 단위로 시술 전에 꼬리 직경을 측정합니다. 이러한 측정은 잘린 원뿔 방정식을 사용하여 부피를 계산하는 데 사용됩니다.
6. 밑면에서 20mm 떨어진 꼬리에 3mm 원주 절개를 표시합니다.
7. 멸균 수술용 칼날(크기 15)로 3mm 전후 피부 절제를 꼼꼼하게 수행하고 수술용 현미경 확대로 기저 혈관 구조를 모두 그대로 둡니다. 먼저 진피를 통해 상원주 표시(꼬리 베이스에서 20mm)를 절개한 다음 첫 번째 절개 부위에서 원위 3mm의 둘레 전체 두께를 절개합니다.
   1. 두 절개 부위를 연결하기 위해 수직 전체 두께의 수직 절개를 만듭니다. 톱니가 있는 가는 픽업을 사용하여 앞쪽 가장자리를 잡고 마이크로 가위를 사용하여 무혈 평면 깊숙한 곳에서 진피와 정맥 외막의 표재성을 조심스럽게 절개합니다.
8. 0.1mL의 이소설판 블루(1%)를 꼬리 끝 근위부에 피
하 주사합니다.
9. 수술 현미경으로 측면 꼬리 정맥에 인접한 두 개의 림프 채널을 확인합니다. 림프관은 이소설판 주입으로 인해 파란색으로 나타납니다. 스트레이트 마이크로 수술 가위를 사용하여 림프관을 절제합니다. 가위를 사용하여 측맥과 림프 사이의 평면을 조심스럽게 절개합니다. 그런 다음 한 가위날의 끝을 림프관과 외측 정맥 사이에 통과시키고 날을 닫아 림프관을 절단합니다.
10. 꼬리 상처에 멸균 접착성 투명 드레싱을 바르십시오. 수술 후 절개 부위가 감염되거나 출혈이 없는지 매일 확인하고 2주 동안 상처 치료를 제공합니다.
11. 꼬리가 더 이상 다치는 것을 방지하고 동물들이 서로 물어 수술 합병증을 일으키는 것을 방지하기 위해 동물들을 단독으로 수용하십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
외과 현미경	Leica, Wetzlar, 독일	MSV266
접착 드레싱(Tegaderm)	3M, 미네소타주 세인트폴	1626W
C57BL/6 마우스	잭슨 연구소	664
Micro-Adson 겸자 - 1x2 치아	Fine Science Tools (미국) Inc.	11019-12
일회용 바늘 30GX1	피셔 사이언티픽	305128
작동 가위	피셔 사이언티픽	12-460-796
이소설판블루(림파주린) 50mg/5ml	마일란	67457-220-05

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