포지셔닝 레이저 도플러 프로브: 쥐 모델에서 혈류 측정을 위해 중대뇌동맥에 프로브를 이식하는 기술

초록

출처: Llovera, G., et al. Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery. J. Vis. 특급. (2021).

이 비디오는 쥐 뇌의 중대뇌동맥(MCA) 위에 레이저 도플러 프로브를 고정시키는 수술 절차를 설명합니다. 이 프로브는 동맥 내 적혈구의 움직임으로 인해 발생하는 도플러 이동을 측정하여 뇌의 미세 혈관 구조의 혈류를 측정하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 레이저 도플러의 준비 및 위치 지정

1. 10 μL 피펫 팁(길이 3-5 mm)의 끝을 절단하여 레이저 도플러 프로브용 홀더를 준비합니다.
   메모: 모든 기기는 핫 비드 살균기를 사용하여 멸균됩니다. 또한 수술 전후에 미생물 소독제 스프레이로 표면을 소독합니다. 수술 전에 생쥐의 머리와 가슴 주위를 상처 소독 스프레이로 소독합니다.
2. 수술 30분 전에 마우스에게 진통제를 주사합니다(4mg/kg 카프로펜 및 0,1mg/kg 부프레노르핀, 복강내).
3. 자발적인 신체 움직임과 진동이 멈출 때까지 4%의 이소플루란 유속으로 마우스를 유도 챔버에 넣어 마취합니다.
4. 마취 마스크에 코를 대고 수술 영역에서 마우스를 엎드린 자세로 놓습니다. 다시 1분 동안 이소플루란 농도를 4%로 유지한 다음 낮추고 2%로 유지합니다.
5. 마우스 체온을 37°C로 유지하기 위해 관련 피드백 제어 발열 패드를 설정하고 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 수술 절차 전반에 걸쳐 온도를 모니터링합니다.
6. 덱스판테놀 아이 연고를 양쪽 눈에 바르십시오.
7. 왼쪽 눈과 귀를 둘러싼 피부와 모발을 70% 에탄올로 소독합니다.
8. 왼쪽 귀와 눈 사이의 두피(1cm 길이)를 잘라 두개골 뼈를 드러냅니다.
9. 두개골 아래의 MCA를 시각화하기 위해 측두근을 자르고 은퇴시킵니다.
10. 왼쪽 MCA 위에 레이저 도플러 프로브/광섬유를 고정하는 팁의 바깥쪽 부분을 접착제로 고정합니다. 그런 다음 피부를 접착제로 발라 팁 홀더 주위의 상처를 봉합합니다. 경화제 접착제 2-3방울을 바르면 처리 속도가 빨라집니다. 레이저 도플러 섬유가 접착되지 않고 언제든지 팁 홀더에서 쉽게 제거할 수 있는지 확인하십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
45° 램프	H&S 쿤스트스토프테크니크		높이: 18 cm
5 mL 주사기	브라운
이소플루란에 대한 마취 시스템	드래거
베판텐 포마드	바이엘
C57Bl/6J 마우스	찰스 리버	000664
에탄올 70%	CLN 케미칼리엔 라보베도르	521005
에탄올 96%	CLN 케미칼리엔 라보베도르	522078
에탄올 99%	CLN 케미칼리엔 라보베도르	ETO-5000-99-1
필라멘트	문서	602112PK5Re
45개의 각진 파인 집게	증권 시세	11251-35
가는 집게	증권 시세	11252-23
파인 가위	증권 시세	14094-11
풀	오레크셀른	BSI-112
경화제 접착제	Drechseln & Mehr	BSI-151
난방 담요	FHC DC 온도 조절기
이소플루란	수도원장	나506
레이저 도플러	페리메드	PF 5010 LDPM, 페리플럭스 시스템 5000
레이저 도플러 프로브	페리메드	Tel.91-00123

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