마우스 모델에서 요추 불안정성의 외과적 유도: 쥐 모델에서 요추 돌기 및 연결된 인대의 절제를 위한 수술 절차

초록

출처: Liu, S. et al. 요추 불안정성의 마우스 모델. J. Vis. 특급 (2021)

이 비디오에서는 요추 L3에서 L5 척추 돌기와 상척수 및 척추간 인대를 절제하여 마우스 모델에서 요추 불안정성을 유도하는 수술 절차를 설명합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수술 전 준비

1. 기구 멸균: 수술 전에 오토클레이브(121°C에서 15분 동안)에서 수술 기구를 증기 멸균합니다. 금속 용기에 기구를 포장하고 수술에 사용될 때까지 보관하십시오.
2. 수술 플랫폼 설정: 수술을 위해 최소 60cm x 60cm의 벤치 공간을 지정합니다. 75% 알코올로 표면 청소하고 일회용 의료용 수건으로 덮습니다. 멸균 수술 기구 팩, 시약, 수술 용품을 위쪽 1/3 영역의 일회용 의료 수건에 놓습니다. 외과 수술을 위해 나머지 2/3 영역을 깨끗하게 두십시오.열 지원을 위해 수술 패드 아래에 핫패드를 추가합니다.
3. 동물 준비
   1. 동물(C57BL/6J 마우스, 수컷, 8주령)을 유도실에 넣습니다. 이소플루란의 경우 4%, 산소의 경우 4L/min의 유도 수준에서 기화기를 켭니다. 동물을 완전히 마취한 후 수술 중 콧방울과 마취제 전달을 이소플루란의 경우 1.5%, 산소의 경우 0.4L/min 수준으로 마취제를 유지합니다. 동물의 호흡을 모니터링하십시오.
   2. 수술 중 각막 건조를 방지하기 위해 chlortetracycline hydrochloride 안연고를 바르십시오.
   3. 작은 동물 트리머를 사용하여 흉부 아래쪽에서 천골 위쪽까지 등 표면의 수술 부위를 면도합니다. 티슈 물티슈로 면도한 털을 제거하십시오.
   4. 면도한 부위에 제모 크림을 바르고 3분 이상 두지 마십시오. 거즈로 크림을 제거하고 0.9% 멸균 식염수 2mL로 씻어냅니다.
   5. 마우스의 복부 아래에 맞춤형 수술용 원통형 패드(그림 1A)를 놓아 요추를 들어 올리고 수술을 용이하게 합니다.

2. 제3요추에서 제5요추(L 3-L₅) 가시돌기에 노출

1. 검지를 사용하여 더 바깥쪽에 있는 요추의 피하 척추돌기를 만지고 흉추 및 천추와 비교하여 요추 부위를 식별합니다.
2. 75% 알코올로 피부를 헹굽니다. 메스 칼날을 사용하여 흉부 중간에서 엉덩이까지 요목 부위를 3-4cm 정도 절개하여 근막을 노출시킵니다.
3. 척추돌기의 끝에 삽입된 후근막의 형태학으로 요추를 식별합니다. 구체적으로, 세 번째 요추 (L₃ )에서 첫 번째 천골 (S₁) 근막은 "V"자 모양으로 다른 근막과 구별됩니다. 마지막 "V" 팁은 첫 번째 천골(S₁) 근막에 연결되고 첫 번째 "V" 팁은 L₃ 가시돌기에 해당합니다(그림 1B).
4. 메스 날로 L₃에서 L₅까지 가시돌기를 따라 양쪽 측면에서 후방 주위 근육을 절개합니다(그림 1C). 출혈을 줄이기 위해 패싯 쪽으로의 절개 깊이를 조절합니다.
5. 두 개의 안과 겸자를 사용하여 근육층을 분리하여 L₃ 에서 L₅ 가시돌기와 척추상 인대를 노출시킵니다.

3. L 3-L_인대와 함께 5개의 가시돌기 절제

1. 비너스 가위를 사용하여 척추간 인대를 절단하여 개별 척추돌기를 분리합니다(그림 1D).
2. 비너스 가위를 사용하여 척추간 인대와 함께 L_{3-L 5} 가시돌기를 절제합니다(그림 1E).
3. 척추주위 근육을 재부착하지 않고 멸균 실크 브레이드(봉합사 크기 5.0)로 절개 부위를 봉합합니다.
4. 수술 부위에 Chlortetracycline Hydrochloride Eye Ointment를 바르십시오.

결과

그림 1: L3–L5 척추돌기 노출 및 LSI 작동.(A) 맞춤형 원통형 패드를 마우스의 복부 아래에 놓습니다. (B) 요추 근막의 노출 및 "V"모양에 의한 L3 대 S1 가시돌기의 식별. (C) L3 - L5 척추돌기 양쪽의 외측 척수근 절개. (D) 척추간 인대를 절단하여 개별 척추돌기의 노출. (E) 척추간 인대(inter- and supra-spinous ligaments)가 있는 L3-L5 척추돌기의 절제술.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
클로르테트라사이클린 하이드로클로라이드 아이 연고	상하이 일반 제약 Co., Ltd.	H31021931	안구 건조를 예방하고, 상처 감염을 예방
C57BL/6J 수컷 마우스	Tian-jiang Pharmaceuticals Company(장쑤성, CN)	SCXK2018-0004	동물 모형
일회용 의료 수건	허난 성 Huayu 의료 기기 Co., 주식 회사.	20160090	외과적 수술을 위한 플랫폼
흡입제 마취 장비	미드마크	매트렉스 3000	마취
이소플루란	심천 RWD 생명 기술 Co., 주식 회사.	1903715	마취
리도카인 염산염	산동 Hualu 제약 Co., Ltd.	H37022839	통증
의료용 봉합사 바늘	상하이 Pudong Jinhuan 의료 제품 Co., Ltd.	20S0401J (영문)	봉합사 피부
안과 겸자	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 수술 기구 공장	JD1050	스킨 자르기
안과용 가위(10cm)	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 수술 기구 공장	Y00030	피부 절개
실크 꼰	상하이 Pudong Jinhuan 의료 제품 Co., Ltd.	AN-번호 11V0820	봉합사 피부
작은 동물 트리머	상하이 Feike 전기 Co., Ltd.	FC5910	제모
멸균 수술용 블레이드(12#)	상하이 Pudong Jinhuan 의료 제품 Co., Ltd.	제35T0707	근육 절개
비트 제모 크림	RECKITT BENCKISER (인도) Ltd	해당 없음	제모
비너스 가위	Mingren 의료 기기	길이 : 12.5cm	근육과 가시 돌기를 잘라냅니다.

합니다. 호