토끼의 간질 이상에 대한 다계통 모니터링: 유도 발작 중 동시 비디오 EEG, ECG, 카프노그래피 및 산소 측정 기록 방법

초록

출처: Bosinski, C., et al. 의식이 있는 제지된 토끼의 발작, 부정맥 및 무호흡 식별을 위한 다중 시스템 모니터링. J. Vis. 특급 (2021).

이 비디오에서는 발작 유발 약물의 정맥 주사 중 신경 및 심폐 이상을 평가하기 위한 다중 시스템 모니터링 방법을 보여줍니다. 비디오 EEG, ECG, 산소 측정 및 카프노그래피 매개변수의 동시 모니터링은 간질 발작과 관련된 실시간 생리학적 변화를 이해하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 토끼가 구속기에 적응하고 조사자가 심폐수의 안정화를 객관적으로 확인할 수 있도록 모든 토끼에게 심폐 및 신경 센서를 계측하고 동물당 1-3회, > 1시간 동안 지속적인 비디오 모니터링을 수행합니다.

2. 정맥 투여 실험 (Pentylenetetrazol, PTZ)

1. 가장자리 귀 정맥을 시각화하려면 토끼 귀의 뒤쪽 표면을 면도합니다. 70% 에탄올 물티슈를 사용하여 부위를 소독하고 가장자리 귀 정맥을 확장하십시오. 이는 그림 1F에서 검은색 점선 타원으로 표시됩니다.
2. 이 시점에서 한 명의 실험자가 토끼의 얼굴을 손으로 가리게 하여 토끼가 받는 절차의 스트레스를 줄이게 합니다. 두 번째 실험자는 멸균 25G 혈관 카테터로 가장자리 귀 정맥을 조심스럽게 캐뉼레이션합니다.
3. 카테터가 정맥에 삽입되면 카테터 끝에 멸균 주사 플러그를 꽂아 바늘이 정맥 주사로 약물을 주입할 수 있도록 합니다. 주입 플러그의 위치는 그림 1G에서 파란색 원으로 표시됩니다.
4. 4 x 4 인치의 거즈를 테이프로 감아 튜브 모양으로 만들고 토끼의 귀 안에 넣어 부목을 만듭니다. 그런 다음 부목을 귀에 테이프로 붙여서 카테터가 제자리에 고정되고 카테터를 삽입하지 않은 귀와 유사하게 똑바로 세워지도록 합니다.
5. 헤파린 처리된 식염수 mL당 10 USP 단위 1mL를 주입합니다.
   메모: 카테터와 혈관은 공기가 눈에 띄게 제거되어야 하며 특허를 받아야 합니다. 카테터가 혈관 안에 있지 않으면 주사기가 쉽게 밀리지 않고 피하 조직에 식염수가 축적됩니다.
6. 토끼에게 10분마다 1mg/kg씩 1mg/kg씩 PTZ를 1mg/kg씩 정맥 주사합니다. 각 투여가 시작될 때 어떤 동물이 주사되고 있는지, 약물의 농도를 표시해 두십시오.
   메모: 이를 통해 PTZ 투여의 급성 및 부가적 효과를 평가할 수 있습니다. 또는 저용량 PTZ의 만성 효과를 추가로 평가하기 위해 토끼는 각 저용량 농도에서 반복 투여, 2mg/kg으로 7회 투여, 5mg/kg으로 3회 투여, 10mg/kg으로 3회 투여, 각 투여량은 10분씩 간격을 둡니다.
7. 각 투여 후에는 신경-심장 전기 및 호흡기 이상과 간질 활동의 시각적 증거가 있는지 비디오-EEG-ECG-카프노그래피-산소 측정법을 주의 깊게 모니터링하십시오. 실시간 및 사후 분석 중에 이러한 변경 사항을 기록하십시오.
   메모: 발작 활동은 종종 PTZ 투여 후 60초 이내에 시작됩니다.

결과

그림 1: 장비에 연결된 토끼.(A) ECG 전극의 위치, 왼팔은 노란색 점으로 표시됩니다. 오른팔은 흰색 점으로 표시됩니다. 왼쪽 다리는 빨간색 점으로 표시됩니다. 오른쪽 다리 앞쪽의 지면은 녹색 점으로 표시됩니다. (B) ECG 및 EEG 전극이 부착된 구속 중인 토끼. (C) 토끼 아래에 부스터, 목 폼 및 절단된 PVC 파이프를 포함하여 더 작은 토끼를 수용할 수 있도록 적절하게 개조된 구속기에 있는 어린 토끼. (D) EEG 전극의 위치와 함께 구속 중인 토끼. 오른쪽 정면은 주황색 점으로 표시됩니다. 왼쪽 정면은 빨간색 점으로 표시됩니다. 오른쪽 후두부는 노란색 점으로 표시됩니다. 왼쪽 후...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
0.9% 염화나트륨 관개, USP - 유연한 용기	화이자(호스피라)	7983-09	희석제
10cc Luer Lock 주사기(20G x 1" 바늘 포함)	수르베트	SS-10L2025	약물 주입 후 플러시로 사용
4x4 거즈 스폰지	피셔 사이언티픽	22-415-469	혈관 카테터로 귀를 부목하기 위해 튜브를 굴려
컴퓨터	작은 골짜기	옵티플렉스 5040	수집 컴퓨터
ECG 전극	리듬링크	RLSND116-2.5	13mm 35도 구부러진(직경 0.4mm) 피하 핀 전극
EEG 전극	리듬링크	RLSP513	5-트위스트 13mm 직선(직경 0.4mm) 피하 핀 전극
이그랩 (2020)	스워츠 컴퓨터 신경과학 센터(Swartz Center for Computational Neuroscience	오픈 액세스	EEG의 스펙트럼 분석을 수행할 수 있습니다
이더넷-이더넷 어댑터	링크시스	USB3G16	카메라를 컴퓨터에 연결하기 위한 어댑터
헤파린 잠금 플러시	메드라인	EMZ50051240	혈관 카테터의 개통을 유지하기 위해
IR 라이트	보쉬	EX12LED-3BD-8W	어둠 속에서도 녹음을 용이하게 합니다.
LabChart Pro (2019, 버전 8.1.16)	광고	해당 사항 없음	ECG 분석
JELCO PROTECTIV 안전 I.V. 카테터, 25 게이지	스미스 메디컬	3060	가장자리 귀 정맥을 catherize하는 데 사용됩니다.
MATLAB (R2019b, 업데이트 5)	매스웍스	해당 사항 없음	EEGLAB을 실행하는 데 필요합니다.
마이크	소니 스테레오	ECM-D570P	발작의 가청 징후 기록
Micropore 의료 테이프, 종이, 흰색	3엠	1530-1	전선을 고정하고 귀 부목을 만드는 데 사용됩니다
나투스 뉴로웍스	나투스	LC101-8	수집 및 검토 소프트웨어
펜틸레네테트라졸 (1 - 10 mg/kg, 항상 1mL 용량)	시그마-알드리치	88580	식염수로 제조된 희석액
양자 증폭기	나투스	13926	증폭기 / 디지타이저
Quantum HeadBox 증폭기	나투스	22134	64핀 브레이크아웃 박스
토끼 레스트레이너	플라스 연구소	501-TC	다양한 크기의 토끼 재조정기를 사용할 수 있습니다.이 연구에서는 6" x 18" x 6"입니다.
SpO2 이어 클립	노닌	61000	퓨어SAT/SpO2
SpO2 센서 어댑터	노닌	13931	엑스포드 퓨어SAT/SpO2
SRG-X120 1080p 회전형 카메라(HDMI, IP 및 3G-SDI 출력	소니	SRG-X120	임펠라 카메라
Terumo Sur-Vet 투베르쿨린 주사기 1cc 25G X 5/8" 레귤러 루어	수르베트	13882	정맥 주사 약물을 주입하는 데 사용됩니다.
수의학 주입 플러그 Luer Lock	수르베트	스립2V	정맥 투여를 위한 바늘을 삽입하기 위한 주입 플러그
Webcol 알코올 준비, 멸균, 대형, 2겹	코비디엔	5110	카테터 삽입 전에 귀 정맥을 준비하기 위해

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