돼지 기관지 조직 추출: 돼지 폐에서 기관지 조직 절편을 해부하는 절차

초록

출처: Harrington, N. E. et al. 낭포성 섬유증 폐에서 녹농균 및 황색포도상구균 생물막의 생체 외 모델에서 항생제 효능 테스트. J. Vis. 특급 (2021)

이 동영상에서는 수확한 돼지 폐에서 세기관지 조직을 추출하는 수술 절차에 대해 설명합니다. 생체 외 세기관지 조직은 만성 폐 감염을 연구하기 위한 감염 모델을 개발하는 데 사용할 수 있습니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 체외돼지폐(EVPL) 조직 해부

1. 도축 후 가능한 한 빨리 지정된 공급원에서 폐를 확보하여 국내 냉장 상자에 담아 실험실로 운송하여 차갑게 보관하십시오.
   메모: 도축 당일에 가까운 폐는 보관으로 인한 멍이 적지만 도축 후 최대 4일 동안 냉장 보관된 조직도 사용할 수 있습니다. 쿨 박스는 정육점이나 도살장으로 가져와야 하므로 매번 사용 후 현지 실험실 지침에 따라 오염을 제거하고 사용하지 않을 때는 미생물학 실험실 외부에 보관하여 오염 및 격리 위반의 위험을 줄여야 합니다.
2. 멸균된 표면과 화염 아래에서 작업하면서 오토클레이브 알루미늄 호일로 덮인 깨끗한 플라스틱 도마에 폐를 놓습니다. 세기관지가 손상되지 않았는지 확인하십시오. 도살장이나 운송 중에 손상이 있는 경우 폐는 사용하기에 적합하지 않습니다.
3. 팔레트 나이프를 화염 아래에서 가열하고 칼을 세기관지를 둘러싼 폐 부위에 아주 짧게 접촉하여 조직 표면을 살균합니다.
4. 멸균 장착된 면도날을 사용하여 세기관지를 둘러싼 표면 조직을 잘라냅니다. 손상을 방지하기 위해 세기....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
70% 에탄올 또는 표면 살균 및 플라민 고프 해부 장비의 유사
알루미늄 호일 - 고압증기멸균으로 사전 멸균 - 폐를 해부할 도마를 덮습니다.
분젠 버너
도마 - 알코올로 쉽게 오염을 제거할 수 있도록 플라스틱 보드를 사용하는 것이 좋습니다.
폐를 실험실로 운반하는 Coolbox
다양한 크기의 해부 가위
Dulbecco의 변형 이글 배지(DMEM)
Fisherbrand 2 mL 강화 튜브	써모 피셔	15545809
대형 팔레트 나이프
장착된 면도날
플라스틱 도마와 알루미늄 호일을 사용하여 멸균 및 세척 가능한 해부 표면 생성
로스웰 파크 기념 연구소 (RPMI) 1640 매체
집게 선택(뭉툭한 끝 권장)
해당 기관의 건강 및 안전 정책에 따라 오염된 날카로운 물건과 돼지 조직을 폐기하기에 적합한 용기입니다.