Nictitating Membrane Removal: 토끼 눈에서 Nictitating Membrane을 제거하는 수술 절차

초록

출처: Honkanen, R. A., et al. 토끼에서 완전한 안구 절제술을 사용한 중증 안구 건조증 모델 구축. J. Vis. 특급 (2020).

이 비디오에서는 토끼 눈에서 갈라지는 막을 제거하는 수술 절차를 보여줍니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. nictitating membrane의 제거

참고: 단순화를 위해 오른쪽 눈을 위한 기술은 아래에 설명되어 있습니다. 동일한 방법으로 왼쪽 눈에도 이 절차를 완료합니다. 적응 기간(보통 첫 주) 동안 양측으로 nictitating membrane을 제거합니다.

1. 토끼를 적절한 크기의 구속 가방에 넣습니다.
2. 토끼를 진정시키기 위해 1cc 주사기와 26G 바늘을 사용하여 어깨에 아세프로마진(1mg/kg)을 피하 주사합니다. 이 가벼운 진정의 종말은 동물이 정상적인 스캔 움직임 없이 편안한 머리 자세를 유지하고 귀가 더 이상 완전히 똑바로 서 있지 않을 때입니다.
3. 마이크로피펫을 사용하여 방부제가 없는 리도카인 25μL(1%)를 눈에 도포합니다. 눈꺼풀 사이에 철사 뚜껑 검경을 삽입합니다.
4. 0.3 겸자(또는 이에 상응하는 것)로 정점에 있는 nictitating membrane을 잡고 각막 표면 위로 당깁니다. 26G 바늘을 사용하여 1:100,000 에피네프린이 함유된 1% 리도카인을 니티테이팅 멤브레인의 결막하 공간에 주입합니다. 약 0.3mL를 주입하여 nictitating membrane 위에 적당한 크기의 bleb를 형성합니다. 1mL 이상의 주입량은 토끼의 경우 안전한 투여 범위(2-4mg/kg) 내에 있습니다.
5. 와이어 검경을 제거합니다. 리도카인과 에피네프린이 효과를 발휘할 때까지 약 5분 정도 기다립니다. 이 시간 동안 동료 눈에도 동일한 절차를 수행합니다.
6. 와이어 뚜껑 검경을 교체하십시오. 0.3 겸자를 사용하여 각막 표면 위의 nictitating membrane을 잡고 확장합니다. 건절개술 가위 또는 이와 동등한 것으로 멤브레인의 바닥을 자릅니다.
   메모: 출혈은 일반적으로 경미하지만 고온 배터리 소작기를 근처에 두고 필요에 따라 사용하여 출혈을 최소화하십시오. nictitating membrane의 절단 기저부에 대한 직접적인 압력은 작은 출혈이 발생할 경우 이를 중지하는 데 사용할 수도 있습니다.
7. 와이어 뚜껑 검경을 제거합니다. 국소 항생제 연고(네오마이신, 폴리믹신, 바시트라신, 하이드로코르티손)를 각막 표면에 바릅니다.
8. 프로토콜에 표시된 대로 동료 눈과 동일한 절차를 수행합니다.
9. 동물을 개별 케이지에 다시 넣고 최소 일주일 동안 또는 임상적 관점에서 결막 표면이 완전히 치유될 때까지 추가 분석이나 중재를 수행하기 전에 치유되도록 합니다.
   메모: 완전한 임상적 치유는 결막 표면의 부기, 주입 또는 분비물이 없는 것으로 표시됩니다. 동물은 보호 안검하수가 없는 상태에서 정상적으로 눈을 뜨고 있어야 합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
아세프로마진, 아세프로인즈	Henry Schein Animal Health, 오하이오주 더블린	NDC11695-0079-8	토끼 진정제를 위한 0.1ml/kg 피하 주사
동물 제지 가방	Henry Schein Animal Health, 오하이오주 더블린	요르벳 J0170	적절한 크기의 가방을 사용하십시오.
소작기, 고온, 배터리 구동	Medline Industries Inc, 일리노이주 노스필드	참조 ESCT001	출혈이 발생할 경우를 대비하여 준비, 프로토콜 2.7
겸자, 0.3	Bausch and Lomb (Storz), 브리지워터, 뉴저지	ET6319	nictating membrane 제거용, 프로토콜 2.5
뚜껑, 검경, 와이어	Bausch and Lomb (Storz), 브리지워터, 뉴저지	바라케르 SUH01	nictating membrane 제거용, 프로토콜 2.4
리도카인 2%와 에피네프린 1:100,000; 50:50 혼합물	Hospira Inc, 레이크 포레스트 일리노이	국토통신번호 0409-3182-02	nictating membranes를 제거하기 전에 전처리, 프로토콜 2.4
리도카인, 방부제 무함유	시그마-알드리치, 미주리주 세인트루이스	L5647	마취제에 대한 PBS에서 1%, 눈에 적용, 프로토콜 2.4
마이크로피펫	에펜도르프	리서치 플러스 100 uL	방부제가 없는 리도카인을 눈에 바르는 경우, 프로토콜 2.4
마이크로피펫 팁	월드 와이드 의료 제품	41071052	방부제가 없는 리도카인을 눈에 바르는 경우, 프로토콜 2.4
바늘, 26게이지	BD, 프랭클린 레이크, 뉴저지	참조 305115	리도카인/에피네프린 주사용, 프로토콜 2.3 및 2.5
토끼, 뉴질랜드 화이트	Charles River Labs, 매사추세츠주 월섬(NZW)	2-3kg	연구용 동물
가위, Westcott 건절개술	McKesson Medical-Surgical, 샌프란시스코, 캘리포니아	밀텍스 18-1480	nictating membrane 제거용, 프로토콜 2.7
주사기, 1cc	BD, 프랭클린 레이크, 뉴저지	참조 309659	리도카인/에피네프린 주사용, 프로토콜 2.3 및 2.5