Performing Injection into Orbital Lobe of Superior Lacrimal Gland: A Technique for Inducing Eye Dry Skin in Rabbit Model(우수 눈물샘의 안와엽에 주사 수행: 토끼 모델에서 안구건조증을 유발하는 기술)

초록

출처: Honkanen, R. A. et al, A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies(눈물샘 주사에 의해 유발된 수성 결핍성 안구 건조증의 토끼 모델: 약물 효능 연구에 적용). J. Vis. 특급 (2020).

이 비디오는 상눈물샘의 안와엽에 Concanavalin A를 주입하여 토끼 모델에서 안구건조증을 유발하는 절차를 설명합니다. 개발된 모델은 안구건조증 치료를 위한 다양한 약물의 효과를 연구하는 데 유용합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 동물 준비

참고: 안와 눈물샘 시스템의 일부가 주입됩니다.

1. 토끼를 아세프로마진 0.2mg/kg으로 피하주사로 진정시킵니다.
2. 안와 주위와 두피 부위의 털을 잘라내고 Nair를 사용하여 남아 있는 털을 완전히 제거합니다. 해부학적 특징과 콘카나발린 A의 미국 유도 주사를 더 잘 시각화할 수 있도록 피부를 완전히 매끄럽게 유지합니다(그림 1).
3. 위에서 설명한 대로 적당한 진정제를 유도합니다.

2. 안와 상눈물샘(OSLG) 주입

>참고: OSLG는 빠르게 연속적으로 이어집니다.

1. 지구에 내측 압력을 가하여 OSLG가 후방 내구에서 돌출되도록 합니다. 후방 내측에서 OSLG의 돌출부와 함께 지구본(그림 2, 빨간색 화살표)에 내압 압력을 가합니다. 돌기는 후방 incisure를 찾기 위한 총 국소화 역할을 합니다.
2. 끝이 닫힌 구부러진 집게를 사용하여 두개골의 뼈 구멍이 느껴질 때까지 해당 부위를 움푹 패입니다. 이것은 돌기 아래의 전방/후방 방향으로 슬릿과 같습니다.
3. 집게로 적당한 압력을 가하여 피부에 움푹 들어간 곳을 남기면 바늘 배치의 랜드마크 역할을 합니다(그림 3A).
4. 움푹 들어간 자국(그림 3B) ~ 1/4인치 위의 피부에 수직인 바늘(27게이지, 5/8인치 바늘이 있는 투베르쿨린 주사기)을 삽입한 다음 주사 부위와 뼈 안와 테두리 사이의 중간 지점을 목표로 하는 측면 안측을 향해 바늘을 후방 및 외부로 리디렉션합니다.
   메모: 주삿바늘이 바늘로 정확하게 조준되지 않으면 두개골이 전진을 막습니다.
5. 바늘의 허브에 도달하면 0.2mL 부피에 1000μg의 Con A를 천천히 주입합니다(그림 3C).
6. 2-3분 이내에 PSLG와 OSLG의 주입을 모두 완료합니다
.
7. 동물을 이소플루란 진정제에서 제거합니다(아직 수행하지 않은 경우). 하눈물샘(ILG)의 주사는 일반적으로 추가 진정제 없이 완료할 수 있습니다.

결과

그림 1: 콘카나발린 A 주사를 위한 토끼의 준비.(A) 작은 가위를 사용하여 털을 제거하여 안와 상눈물샘을 식별하기 위해 랜드마크를 쉽게 시각화할 수 있습니다.(B) Nair는 전단 후 남아 있는 털을 제거하는 데 사용됩니다.

그림 2: 안와 상눈물샘(orbital superior lacrimal gland)의 국소화(Localization of the orbital superior lacrimal gland).

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
100mm 매크로 렌즈	캐논 EF 100mm f/2.8L IS USM	제3554B002
26 게이지 바늘 (5/8)	벡턴 디킨슨 앤 컴퍼니, 프랭클린 레이크, 뉴저지	305115	ConA를 에 주입하기 위한 바늘 눈물샘
27 게이지 바늘 (5/8)	벡턴 디킨슨 앤 컴퍼니, 프랭클린 레이크, 뉴저지	305921	ConA를 에 주입하기 위한 바늘 눈물샘
아세프로인즈(아세프로마진)	헨리 샤인 동물 건강, 더블린, 오하이오	NDC11695-0079-8	0.1ml/kg 피하 주사 토끼 진정제용
마취 기화기	VetEquip, 플레즌튼, CA	상품 #911103
비숍 하몬 집게	바우쉬 롬 (Storz), 브리지워터, 뉴저지	E1500-C	조직 겸자
캘리퍼스	바우쉬 롬 (Storz), 브리지워터, 뉴저지	E-2404	의 길이를 측정하는 데 사용되는 캘리퍼 ConA 주입 중 바늘
콘카나발린 A	시그마, 세인트루이스, 미주리	2010	주입을 위한 PBS에 있는 5mg/ml를 만드십시오 토끼 눈물샘으로
토끼, 뉴질랜드 화이트 또는 Dutch Belted (텍스트에 설명 된대로)	Charles River Labs, 매사추세츠주 월섬	2-3kg	연구용 동물
수술용 확대경 +1.50	Designs for Vision, 보헤미아, 뉴욕	특산품	ocular 의 magnificantion를 제공하십시오 tear break 를 관찰하면서 표면 up and performing Concanavalin A 주사.

호 년