혈관 조영술을 통한 혈관 관류 평가: 토끼 모델에서 혈관 관류를 시각화하기 위해 하행 대동맥에 조영제를 도입하는 기술

초록

출처: Sligar, A. D et al., 당뇨병 토끼의 뒷다리 허혈의 전임상 모델. J. Vis. 특급 (2019).

이 동영상은 토끼 모델에서 혈관 관류를 시각화하기 위해 하행 대동맥에 조영제를 주입하여 혈관 조영술을 수행하는 기술을 설명합니다. 이 기술은 막힌 혈관과 회복 중 치료 후의 관류를 이해하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수술을 위한 토끼의 준비

1. 피하 주사를 통해 20-40mg/kg 케타민과 2mg/kg 미다졸람을 사용하여 토끼를 마취합니다. 마스크를 사용하여 초기 진정 기간 동안 토끼를 1.5%-3% 이소플루란(일반적으로 2%)에 놓습니다. 마취를 유지하기 위해 3mg/kg의 근육 주사를 통해 알파살론을 주사합니다.
2. 마취가 끝나면 마스크를 제거하고 커프가 채워진 기관내관을 기도에 삽입하고 인공호흡기에 연결합니다. 이소플루란을 1.5%–3%로 계속 투여합니다.
3. 기준선 화학 패널을 위해 양쪽 귀의 중앙 동맥에서 혈액을 수집합니다.
4. 22G의 귀정맥 카테터를 외이 정맥에 삽입하여 수술 과정 전반에 걸쳐 Lactated Ringer's Solution을 드립합니다. 또는 생리식염수(0.9% 염화나트륨)를 사용할 수 있습니다.
5. 반대쪽 귀의 외측 정맥을 사용하여 정맥에 카테터를 삽입하고 6mg/kg/h의 속도로 알팍살론을 투여합니다. 준비 기간 동안 알팍살론을 8mg/kg/h로 점진적으로 증가시키고 이소플루란을 0.6%로 줄입니다.
6. 통증과 감염 위험을 제한하기 위해 25G 주사로 피하 주사를 사용하여 부프레노르핀(0.01mg/kg)과 엔로플록사신(5mg/kg)을 투여합니다.
7. 목, 좌우 허벅지 안쪽, 등의 털을 이발기(#40 면도날)를 사용하여 다듬습니다. 접지 패드와의 접촉을 유지하기 위해 뒤쪽에서 머리카락을 제거합니다.
8. 각 뒷다리에 혈압 커프를 놓고 초기 혈압을 측정합니다. 커프를 무릎 바로 아래에 놓고 프로브를 측면 표면의 호크 바로 위에 놓습니다.
9. 수술대 위에 토끼를 등에 대고 놓고 수술 부위를 문지르고 드레이프합니다. 여기에는 경동맥 접근을 위한 목과 대퇴 동맥 접근을 위한 오른쪽 허벅지 안쪽이 포함됩니다. 2% 클로르헥시딘과 70% 에틸 알코올을 번갈아 가며 스크럽하여 살균 스크럽을 수행합니다. 이것을 세 번 반복한 다음 2% 클로르헥시딘 용액을 섞어 최종 스프레이를 바릅니다.
10. 저밀도 폴리에틸렌 백 안에 멸균된 3mm 스테인리스 스틸 볼을 허벅지 위쪽 근처의 오른쪽(스크럽) 다리 위에 놓고 혈관 조영술 측정 시 크기 참조로 사용합니다. 수술 전까지 다리에 멸균 드레이프를 씌웁니다. 첫 번째 혈관 조영술 동안 멸균 비닐 봉지 안에 공을 그대로 두십시오.

2. 혈관 조영술

1. 올바른 총경동맥 노출
   1. #15 날이 있는 메스를 사용하여 기관 바로 옆쪽으로 4-5cm 길이의 절개를 만듭니다.
   2. 둔기 절개를 사용하여 경동맥을 노출시키고 작은 Weitlaner 견인기를 사용하여 절개 부위를 엽니다. 경동맥을 경정맥과 미주신경에서 조심스럽게 분리한다. 일반적으로 구부러진 Metzenbaum 가위와 구부러진 모기 지혈제는 무딘 해부에 사용됩니다. 경동맥과 신경과 경정맥을 완전히 분리하여 결찰자가 동맥만 결찰하도록 해야 합니다.
2. 노출된 동맥의 근위부와 원위부 끝에 4-0 실크 봉합사를 사용하여 합자를 놓습니다. 경동맥의 말단부를 외과 의사의 매듭으로 묶은 다음 4개의 사각형 매듭을 짓습니다. 근위부 끝에서는 리갈루프를 사용하여 필요에 따라 조이거나 풀릴 수 있도록 합니다. 노출된 동맥의 근위부 끝에 배치된 리갈루프를 사용하면 도입부와 카테터를 고정하는 데 도움이 될 수 있습니다.
3. IV를 통해 500IU의 헤파린을 투여합니다. 노출된 경동맥을 따라 약 0.5mL의 1% 리도카인을 사용하여 혈관을 확장시킵니다. 일반적으로 한 번의 치료로 충분하지만 필요에 따라 반복할 수 있습니다. 메스 또는 홍채 가위를 사용하여 경동맥을 약 절반 정도 자른 다음 4인치 와이어 삽입 도구를 동맥에 놓습니다.
4. 삽입 도구를 통해 0.014인치 x 185cm 가이드와이어를 하행 대동맥의 장골능(iliac crest)에 있는 대동맥 분기점(aortic bifurcation)에 공급합니다. 삽입 도구를 제거하고 와이어에 3F 피그테일 혈관 조영 카테터를 삽입합니다.
5. 땋은 머리 카테터를 하행 대동맥의 장골능(iliac crest)에서 대동맥 분기점에 2cm 근접하도록 전진시킵니다.
6. 카테터 끝을 7번째 요추와 첫 번째 천추 사이에 놓습니다. 2-4mL의 조영제를 수동으로 주입하여 카테터의 위치를 테스트합니다.
7. 혈관 확장을 증가시키기 위해 카테터를 통해 100μg의 니트로글리세린을 동맥 내 주사합니다.
8. 혈관 조영술 중 혈관 확장을 돕기 위해 카테터를 통해 토끼에게 1% 리도카인 0.8mL를 투여합니다. 인젝터용 튜브를 카테터에 부착하고 라인의 기포를 제거합니다. 카테터를 통해 자동 혈관 조영술 주입기를 사용하여 8-9mL의 조영제를 주입합니다.
9. 혈관 조영술을 사용하여 뒷다리의 연속 이미지를 기록합니다.
   1. 파워 인젝터를 3mL/초의 속도로 총 8-9mL로 조영제를 주입하도록 설정합니다. 초당 6프레임으로 디지털 감산 혈관 조영술을 수행합니다.
   2. 생성된 연속 이미지를 선택하고 약 -40% 설정을 사용하여 각 혈관 조영술의 사진을 변경하여 뼈 모양을 최소화하고 대비와 함께 혈관 관류의 완전한 그림을 캡처합니다. 대퇴동맥 결찰/절제 후 혈관 흐름의 혈관 조영술의 예가 그림 1에 나와 있습니다.

결과

그림 1: 당뇨병이 있는 토끼와 당뇨병이 없는 토끼의 뒷다리에 대한 수술 전, 수술 후, 대퇴 동맥 결찰 및 절제 후 70일 동안 회복 후의 혈관 조영술.(A) 허혈성 사지(왼쪽)와 반대쪽 대조 사지(오른쪽)의 혈관 조영술. (B) 결찰 부위의 허혈성 사지의 확대 이미지.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
혈관 조영술 장비	도시바	인닉스-i
가이드와이어	보스턴 사이언티픽	39122-01
삽입 도구	메리트 메디컬 시스템(Merit Medical Systems)	맵550	금속 와이어 삽입 도구
리도카인	McKesson 의료-외과	239936
리가루프	V. 뮬러	채널 117 / 채널 116	화이트 미니 / 옐로우 미니
피그테일 카테터	메리트 메디컬 시스템(Merit Medical Systems)	제1310-21-0053	3F 땋은 머리
실크 봉합사	Ethicon-Johnson & Johnson	A183H	4-0 실크 넥타이 18"
주사기 펌프	DRE 수의학		버사플로우 VF-300
Visipaque 콘트라스트 미디어	McKesson 의료-외과	509055
혈관 조영술 주사기	메드라드

년 호