토끼 종골 결손 모델 생성: 뼈 재생 능력을 위한 뼈 대체 재료를 평가하기 위해 토끼 두개골 상단 부분에 둥근 결손을 생성하는 수술 절차

초록

출처: Marger, L. et al., 뼈 치환 재료의 뼈 성장 및 신생혈관 형성 평가를 위한 토끼의 뼈 확대의 칼바림 모델. J. Vis. 특급 (2019).

이 비디오에서는 관심 있는 뼈 샘플 대체 재료의 뼈 재생 능력을 평가하기 위해 토끼 종골 모델을 생성하는 수술 절차를 설명합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수술

1. 현장 준비
   1. 수술대 위의 매트리스 패드(화상 방지를 위해)로 덮인 가열된 패드(39°C)에 토끼를 놓습니다. 두피를 면도합니다.
   2. 자극과 건조를 피하기 위해 눈에 윤활 젤을 바르십시오. 포비돈 요오드(10%)로 피부를 문질러 부위를 소독합니다. 그런 다음 멸균 수술용 드레이프로 토끼를 감싸고 두개골이 접근할 수 있는 영역을 잘라냅니다.
   3. 포비돈 요오드(10%)로 수술 부위를 두 번째로 소독합니다. 자극과 건조를 피하기 위해 눈에 윤활 젤을 바르십시오.
   4. 전체 수술 트레이를 놓을 드레이프 테이블(멸균 드레이프)을 준비합니다.
2. 수술 부위 개구부
   1. 두개골에 리도카인 2%(1mL)의 피하(SC) 주사로 국소 마취합니다.
   2. 안와에서 외부 후두 돌기(길이 ~4cm)까지 갈리 시상선을 따라 피부를 절개합니다(메스로). 골막이 절개되었는지 확인하십시오.
   3. 절개 부위 양쪽에 있는 골막(골막막 엘리베이터 사용)을 부드럽게 들어 올립니다. 멸균 식염수로 부위를 헹굽니다.
3. 실린더 배치
   1. 두개골에서 정중 봉합사와 관상 봉합사를 찾습니다(그림 2A, B). 이러한 해부학적 선은 십자가를 형성합니다. 실린더는 십자가로 정의된 각 사분면에 배치되어 실린더의 가장자리가 봉합사 위에 있지 않도록 합니다(그림 2C).
   2. 첫 번째 실린더를 왼쪽 위쪽 사분면(왼쪽 정면 뼈)에 놓고 장치를 평평하게 놓습니다. 강한 손 압력으로 위치를 고정하고 저항이 느껴질 때까지 마이크로 나사를 조입니다. 나사 머리가 실린더 탭의 표면과 같은 높이인지 확인하십시오.
   3. 다른 탭에서도 동일한 절차를 반복하여 실린더를 두개골에 단단히 고정합니다. 실린더가 뼈에 밀폐되어 있는지 확인하십시오.
   4. 오른쪽 상반신(오른쪽 전두골), 왼쪽 하반신(왼쪽 두정골) 및 오른쪽 하반신(오른쪽 두정골)에 대해 절차를 반복합니다.
4. 실린더로 둘러싸인 영역 내에 있는 5개의 골수내 구멍의 뼈 드릴링(그림 1)
   1. 식염수 관개 (직경 0.8mm, 깊이 ~ 1mm)에서 실린더로 둘러싸인 영역의 중앙에 뼈에 둥근 버가있는 골수 내 구멍을 뚫습니다. 출혈이 나타나는지 확인하십시오.
   2. 실린더의 내부 가장자리에서 두 개의 탭 나사를 통과하는 축을 따라 두 개의 골수 내 구멍을 더 뚫습니다. 수직 축을 따라 실린더의 내부 가장자리에 골수 내 구멍을 두 개 더 뚫습니다. 출혈이 나타나는지 확인하십시오.
   3. 다른 세 개의 실린더 내에서 작업을 반복합니다.
5. 실린더에 재료 시료 주입 및 캡핑(그림 3)
   1. 제조업체 지침 또는 재료 사양에 따라 원하는 뼈 대체 재료를 준비합니다.
   2. 첫 번째 실린더를 재료 샘플로 가장자리까지 채우고 캡을 끼워 실린더를 닫습니다. 다른 3개의 실린더에서 이 과정을 반복합니다.
6. 수술 부위 폐쇄
   1. 간헐적인 비흡수성 봉합사로 실린더 위의 피부를 닫습니다.
   2. 상처 부위에 스프레이 가능한 드레싱을 바릅니다.

2. 수술 후 치료

1. 진통제 및 마취제(프로포폴 및 펜타닐 관류 정지) 공급을 중지하고 자율 호흡의 회복을 확인합니다.
2. 동물이 자율 호흡을 회복하면 환기를 중지하십시오. 완전히 깨어나기 전에 동물을 순수한 산소 상태로 유지하십시오.
3. 부프레노르핀 염산염 SC(0.02 mg/kg, 0.03 mg/mL, 0.67 mL/kg)를 주사하고 수술 후 진통제로 6일 동안 3시간 간격으로 주사를 반복합니다.
4. 동물을 물과 함께 평소 집으로 옮기고 완전히 먹이십시오.

결과

그림 1: PEEK 실린더 사양. 나사 고정을 위해 측면 안정화 탭에 두 개의 구멍 (직경 0.8mm)을 뚫었습니다. 실린더로 구분 된 영역 내에서 두개골에 뚫을 5 개의 골수 내 구멍 (직경 0.8mm)의 위치는 빨간색 원으로 표시됩니다.

그림 2: 토끼 두개골의 대표 이미지와 원통의 배치. 토끼 두개골의 정중 및 관상 봉합사를 보여주는 사진으로, 좌우 두정골 및 전두골(A,B)을 나타냅니다. 봉합사의 양쪽에 실린더를 배치하는 것...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
마약
펜타닐	비셸		진통제의 경우
케탈라 50mg/ml	화 이자		마취용 케타민
리도헥	빅셀		눈을 위한 윤활젤
반대편	스미스와 조카	66004978	스프레이 가능한 드레싱
포비돈 요오드 10%, 베타딘	먼디제약		항감염제
프로포폴 2%	브라운	3538710	마취용
라피도카인 2%	신테티카		국소 마취
굴뚝 2%	바이엘		마취를 위한 자일라진
세보플루란 5%	애브비		마취용
설비
프레지니우스 바이알 파일럿 C	이멕스메드		주입 펌프
가열식 패드	하버드 기구
흡입력 우세한 50	메델라
흡입 튜브 옵티머스	프로메디컬	80342.2
수술용 모터	Schick 덴탈	큐브	골수내 구멍 드릴링
환기	마케 서보1
재료
실린더 및 캡	부티플라스트	주문을 받아서 만들어진	구성 : PEEK (폴리 에테르 에테르 케톤)
수동 자체 유지 샤프트	글로벌D	액티1K
자체 고정 샤프트를 위한 모바일 핸들	글로벌D	증권 시세
셀프 드릴링 나사	글로벌D	VA1.2KL4	티타늄 grade5, ISO 5832-3으로 구성된 크로스 드라이브 나사
수술용 트레이
기관내관, Shiley 직경 2,5mm	코비디엔	86233	삽관용
기관내관, Shiley 직경 4,9mm	코비디엔	107-35지	삽관용
에티콘 프롤렌 4-0	에티콘	8581H	비흡수성 봉합사
집게	마르셀 블랑	BD027R	145의 mm
삽관 카테터	쿡 메디컬		삽관 안내
둥근 외과 burs	패터 슨	78000	직경 0.8mm, 골수내 구멍 뚫기
메스	스완-모튼		N°10 및 N°15
가위	마르셀 블랑	657	180의 mm
주사기 Omnifix	브라운	4616057V	5ml, 10ml 및 50ml
벤플론 G22	브라운	제42690985-01	귀 iv 라인에 대한 Vasofix 안전성