재조합 아데노 관련 바이러스 기반 유전자 전달: 설치류 모델에서 이식유전자 전달 및 심장 특이적 발현을 위한 기술

초록

출처: Ding, J. et al. 쥐의 심장에서 유전자를 과발현하거나 녹다운하기 위한 rAAV9의 준비. J. Vis. 특급 (2016년)

이 비디오에서는 새끼 쥐에서 재조합 아데노 관련 바이러스 기반 유전자 전달을 보여줍니다. 이 방법은 표적 세포의 유전자 발현을 연구하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

1. 피하 주사로 P0.5-P2.5에서 rAAV9로 신생아 마우스를 치료합니다.

1. 29G1/2, 0.33 x 12.7mm 인슐린 주사기에 재조합 아데노 관련 바이러스 9(rAAV9) 용액을 미리 채웁니다. 기포를 제거하도록 주의하십시오.
2. 냉동 마취된 강아지를 엄지와 검지로 한 손으로 잡습니다. 주사하기 전에 70% 이소프로필 알코올로 적신 면봉으로 강아지의 뒷피부를 문질러 멸균 상태를 유지하십시오. 주사기 바늘을 동물의 전방-등쪽 피하에 5-10° 각도로 삽입합니다. 인슐린 주사기를 사용하여 rAAV50 용액 70-70 μl를 주입합니다.
   참고: rAAV9는 복강내 또는 정맥 주사를 통해 마우스에 전달할 수도 있습니다. 심장에서 전달된 유전자의 효율적인 발현을 얻을 수 있습니다. 그러나 복강내 주사는 때때로 간에서 누출 발현을 유발할 수 있습니다. 주사 후 새끼의 상태를 매일 모니터링했습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
rAAV9 벡터	펜 벡터 코어	1967쪽