Safranin-O 염색: 연골의 구조적 무결성 및 세포성을 시각화하는 방법

초록

출처: Zhao, Y., et al. 골관절염에서 프로그래눌린의 보호 역할을 조사하기 위해 생쥐에서 수술 유도 모델 구축. J. Vis. 특급 (2014).

이 동영상에서는 사프라닌-오렌지를 사용한 연골 염색 절차를 보여줍니다. 이 방법은 연골을 시각화하고 손상을 감지하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

1. 사프라닌 O 염색

1. 불안정한 내측 반월판이 있는 안락사된 마우스 모델의 외측 과두의 중심에서 내측 과두의 중심까지 영역에 걸쳐 있는 연속적인 시상 절편을 포함하는 유리 슬라이드로 시작합니다.
2. 다음으로, 슬라이드를 옥실렌으로 파라핀화하고 에탄올 구배로 증류수로 수화합니다. 그 후, 슬라이드는 Weigert의 철 헤마톡실린 용액, 0.05% 패스트 그린(FCF) 용액, 1% 아세트산 용액 및 0.1% 사프라닌 O 용액을 통해 염색됩니다. 수지 매체를 사용하여 슬라이드를 장착합니다.
3. 연골의 프로테오글리칸(빨간색) 손실과 연골 구조의 파괴 비율을 기반으로 Safranin O-stained slides에 점수를 매기고 조직학적 점수에 대한 통계 분석을 수행합니다.