방법 논문

Toluidine Blue Staining of Peripheral Nerve Sections: A Techniques to Stain Myelinated Nerve Fibers For Peripheral Nerve Structure Visualization (말초 신경 절편의 톨루이딘 블루 염색: 말초 신경 구조 시각화를 위한 수초신경 섬유를 염색하는 기술)

2025년 7월 8일

이 논문에서

초록

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출처: Ghnenis, A. B. et al., 말초 신경 형태 평가를 위한 수지 내장 절편의 톨루이딘 블루 염색.J. Vis. 특급(2018년)

이 비디오는 톨루이딘 블루를 사용하여 수지가 내장된 오스뮴 사산화수소 처리된 쥐 말초 신경 절편의 염색 기술을 보여줍니다. 염색된 신경 부분은 말초 신경의 미세한 구조를 시각화하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

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동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 톨루이딘 블루 스테인링

  1. 탈이온수 100mL에 붕산나트륨 2g을 용해시켜 톨루이딘 블루 1% 용액을 준비한 다음 톨루이딘 블루 1g을 넣고 녹을 때까지 저어줍니다. 여과지(기공 크기: 11μm)를 사용하여 용액을 여과하고 용액을 불투명한 병에 담아 실온에서 최대 2주 동안 보관합니다.
  2. 플라스틱 피펫 또는 마이크로 피펫터를 사용하여 신경 섹션 상단에 톨루이딘 블루 용액 한 방울을 넣고 20-30초 동안 그대로 둡니다.
  3. 슬라이드를 탈이온수 항아리에 부드럽게 담궈 톨루이딘 블루 용액 과잉을 모두 헹구고 단면이 깨끗해질 때까지 3-4회 반복합니다. 슬라이드를 60°C에서 최소 15분 또는 실온에서 하룻밤 동안 건조시킨 다음 일반 장착 매체를 사용하여 커버슬립으로 섹션을 덮습니다. 장착된 슬라이드를 즉시 검사하거나 실온에서 보관하십시오.
  4. 광학 현미경으로 검사하십시오. g-ratio를 계산하는 데 사용되는 상세 이미지에는 100X oil immersion lens를 사용하는 것이 좋습니다.

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공개 사항

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선언된 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
톨루이딘 블루 O시그마-알드리치T3260
나트륨 테트라 보레이트 데카 하이드레이트아크로스 오가닉스205950010
현미경 커버 유리피셔 사이언티픽12545102
VWR 마이크로 슬라이드, 슈퍼프로스트 플러스폭스바겐제48311-703
100와트 오븐밀리포어 6350115
Whatman 여과지시그마-알드리치WHA10010155
Olympus 형광 현미경듀얼 CCD 컬러 및 흑백 카메라, DP80
3 mL 플라스틱 피펫시그마-알드리치Z331740
호

재인쇄 및 허가

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태그

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