Masson Goldner Trichrome Staining: 심혈관 섬유증 감지를 위한 심장 절편의 콜라겐을 시각화하는 기술

초록

출처: Valentin, J., et al. 쥐의 만성 심근 경색의 조직학적 정량화. J. Vis. 특급.(2016).

이 비디오는 심장 병리학과 관련된 섬유성 성장을 시각화하기 위해 심장 조직의 콜라겐 섬유, 핵 및 세포질의 차등 염색을 보여줍니다.

프로토콜

1. Masson-Goldner 트리크롬 염색

1. 파라핀이 함유된 심장 블록에서 수동 마이크로톰(두께: 5μm)으로 조직 절편을 만듭니다.
2. Masson-Goldner 삼색 염색으로 각 쥐의 각 심장 부분에서 하나의 슬라이드(슬라이드당 3-4개의 횡단 섹션)를 염색합니다.
   1. 오븐에서 60°C에서 슬라이드를 녹입니다. 흄 후드 아래에서 각각 10분 동안 두 번 자일롤을 사용하여 파라핀을 제거합니다. 100% 에탄올, 95% 에탄올, 70% 에탄올, 증류수에 각각 3분씩 재수화시킵니다.
   2. 하룻밤 사이에 Bouin 용액으로 수정하십시오. 그런 다음 흐르는 수돗물에 10-15분 동안 헹굽니다. 증류수로 헹굽니다. Mayer의 hematoxylin에서 3 분 동안 배양하십시오.
   3. 슬라이드를 제거하고 증류수에 5분 동안 그대로 두십시오. 그런 다음 산성 Fuchsin-Ponceau에서 5분 동안 배양합니다. 1% 아세트산으로 1분 동안 헹굽니다.
   4. 다음으로, 포스포몰리브딕산 오렌지 G에서 1분 동안 배양합니다. 1% 아세트산으로 1분 동안 헹구고, 연한 녹색 염료로 10분 동안 배양한 다음 1% 아세트산으로 1분 동안 헹굽니다.
   5. 70% 에탄올(30초), 95% 에탄올(30초) 및 100% 에탄올(5분)로 탈수합니다. 조직 부분에 수지 장착 매체 한 방울을 떨어뜨리고 커버 슬립으로 덮고 건조시킵니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
마이어 헤마톡실린	MHS32-1L	시그마 알드리치
산성 푹신 CI 42685	F8129-50G	시그마 알드리치
폰소 자일리딘 CI 16150	P2395-25G	시그마 알드리치
오렌지 G CI 16230	O3756-100G	시그마 알드리치
라이트 그린 CI 42095	L5382-25G	시그마 알드리치
자일롤	10315083	니 웰
에탄올 앱솔루트	10303990	니 웰
Sterelogical microscope (줄기 현미경	SM2800	니콘
포름알데히드	99340	리액토랩
임베딩 카세트	K113.1	칼 로스
Bersoft 이미지 측정 소프트웨어		Bersoft.com	라이센스가 부여된 소프트웨어

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