방법 논문

이중 염색 방법: 루테늄 레드와 락토페놀 코튼 블루를 사용하여 식물-곰팡이 상호 작용을 시각화하는 기술

2025년 7월 8일

이 논문에서

초록

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

출처: Marques, J. P. R. 및 Nuevo, L. G. 식물-곰팡이 상호 작용에서 펙틴을 감지하는 이중 염색 방법. J. Vis. 특급. (2022).

이 동영상은 루테늄 레드와 락토페놀 코튼 블루를 사용하여 커피 녹병 식물에서 식물과 곰팡이가 상호 작용하는 동안 펙틴과 키틴을 시각화하는 이중 염색 방법을 보여줍니다. 이 절차는 곰팡이 감염 중 식물 방어 메커니즘을 이해하는 데 도움이 됩니다.

프로토콜

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. 이중 염색 공정

  1. 커피 녹병에 감염된 Coffee arabica cv. Catuaí의 초박형 수지 내장 잎 부분으로 시작합니다. 락토페놀(물 중 글리세롤 40%, 페놀 20%, 젖산 20%)에 5% 코튼 블루 2mL를 묻혀 섹션을 덮고 45°C의 핫 플레이트에서 5분 동안 가열합니다(그림 1A).
  2. 증류수를 채운 비커에서 슬라이드를 세 번 세척하여 여분의 염료를 제거합니다(그림 1B-D).
  3. 2mL의 0.01% 루테늄 레드로 1분 동안 염색합니다(그림 1E).
  4. 증류수를 채운 비커에서 슬라이드를 세 번 세척하여 여분의 염료를 제거합니다(그림 1F,G).
  5. 광학 현미경 분석을 수행하기 위해 섹션 위에 증류수 한 방울을 떨어뜨리고 섹션을 24mm x 60mm 커버슬립으로 덮습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
그림 1: 이중 염색 프로토콜의 개별 단계에 대한 세부 정보. (A) 면을 입힌 블루 락토페놀 방울로 섹션을 덮고 45°C에서 핫 플레이트의 슬라이드를 가열합니다. (B-C) 증류수로 세척하여 여분의 염료를 제거합니다. (D) 세탁 후 유리가 미끄러지는 부분(화살표로 표시). (E) 루테늄 레드 방울로 섹션을 덮습니다. (F-G) 증류수로 세척하여 여분의 염료를 제거하십시오.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
선언된 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
핫 플레이트두베서SSCD25X30-110V얼룩
코튼 블루 락토페놀메타퀴미카70솔시그024629얼룩
현미경 검사 법자이스#의 490040-0030-000이미지 캡처
플라스틱 몰딩 컵 트레이EMS (엠에스)10176-30얼룩
루테늄 레드랩하우스#006004얼룩
소프트웨어: Axion Vision자이스#410130-0909-000이미지 캡처
년

재인쇄 및 허가

이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청

허가 요청

태그

관련 논문