이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
방법 논문
1K 조회수
⸱
2025년 7월 8일
출처: Kumar, S. B. et al., 생체 외 세포 및 조직에서 포도당 흡수의 간접 측정으로서의 세포외 포도당 고갈.J. Vis. 특급(2022년)
이 비디오에서는 적출된 쥐 장기에서 세포외 포도당 아날로그 고갈을 측정하는 생체 외 기술을 보여줍니다. 그것은 세포가 흡수하는 형광 표지된 디옥시글루코스(deoxyglucose)를 포함하는 용액에서 마우스 조직을 배양하는 것을 포함합니다. 포도당 아날로그 흡수는 배양된 배지의 형광을 측정하여 간접적으로 결정할 수 있습니다.
동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.
참고: 모든 절차는 송풍기를 켜고 조명을 끈 상태에서 클래스 II 생물 안전 캐비닛에서 수행해야 합니다.
1. 재료 준비
참고: 모든 재료는 재료 표에 나열되어 있습니다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
그림 1: 생체 외 다양한 장기에서 세포 외 FD-포도당 고갈의 동역학 (A-C) Lepob 마우스에 비히클(PBS, n = 4), 인슐린(12 IU/kg BW, n = 3) 및 AAC2(1 nmol/g BW, n = 3)를 주입했습니다. 15분 후, 조직을 해부하고 분리했습니다. (A) 내장 지방, (B) 간 및 (C) 뇌의 외식을 FD-포도당(0.29mM)에서 배양했습니다. 세포외 포도당 고갈의 동역학은 서로 다른 시점에서 배지의 부분 표본으로 측정되었습니다. 데이터(평균 SD)는 배양 0분 시 각 장기의 형광 %로 표시됩니다. 유의성 P <.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 96웰 플레이트 | 송골매 | 353227 | 플라스틱 도자기 |
| 나6. V-Lepob / J 수컷 마우스 | 잭슨 연구소 | 재고 번호 000632 | 마우스 |
| BioTek Synergy H1 모듈식 멀티모드 마이크로플레이트 리더(Fisher Scientific, 미국) | Fisher Scientific, 미국 | Fisher Scientific, 미국 | 장치 |
| 세포 배양기 | 견적 | 시리즈 II 워터 재킷 | 장치 |
| 다이어트(마우스/랫트 다이어트, 방사선 조사) | 엔비고 | 테클라드 LM-485 | 다이어트 |
| 이소플루란, 5% | 헨리 샤인 | 재질 보기 NDC 11695-6776-2 | 아네스테틱 |
| 인산염 완충 용액 | 시그마-알드리치 | DA537-500 밀리리터 | 세포 배양 |
| 페니실린/스트렙토마이신(P/S) | Gibco/써모피셔 | 15140-122 | 세포 배양 |
| 무포도당 및 페놀 레드 무함유 DMEM | Gibco/써모피셔 | A14430-01 | 세포 배양 |
| 형광 2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl) amino]-Dglucose) | 시그마 | 72987-1MG | 시험 |
| 둘베코의 변형된 독수리 매체 | Gibco/써모피셔 | 11965-092 | 세포 배양 |
| 소 세럼 | Gibco/써모피셔 | 제161790-060 | 세포 배양 |
| 에탄올 | 시그마-알드리치 | E7023-500mL | 시약 |
