피부 염증을 유발하여 항원에 대한 면역 반응을 평가하는 기법

초록

출처: Yao, Y., et al. IL-1β 프로모터 기반 DsRed 리포터 마우스를 사용한 호중구 프라이밍의 생체 내 이미징. J. Vis. 특급 (2016).

이 동영상은 쥐 모델에서 피부 염증을 유발하여 테스트 항원을 평가하는 생체 내 기술을 보여줍니다. 오일/아세톤 용액에 함유된 합텐(hapten)인 테스트 항원을 마우스 귀 피부에 국소적으로 적용하고 적절한 기간 후에 피부의 염증을 평가합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. pIL1-DsRed 마우스의 피부 염증 유발

1. 100 mg/kg 케타민, 10 mg/kg 자일라진 및 1 mg/kg 아세프로마진을 함유한 마취 칵테일의 복강내(i.p.) 주사로 마우스를 마취합니다. 적절하게 마취된 마우스는 발가락 꼬집음에 뒷발 철수를 보이지 않습니다.
2. 제모 크림을 마우스의 양쪽 귀의 등 표면에 바릅니다. 30초에서 1분 동안 기다립니다. 물에 적신 솜으로 귀 표면을 닦고 자연 건조시킵니다.
3. 마이크로미터를 사용하여 귀 두께를 측정하고 마우스를 별도의 케이지에 교체합니다. 마취에서 회복 될 때까지 관찰하십시오 (~ 15-30 분). 제모 제품으로 인한 피부 염증을 해결하려면 추가 실험을 수행하기 전에 마우스를 3일 동안 쉬게 하십시오.
4. 16.7mg의 OX를 아세톤 1ml에 용해시키고 750μl의 OX/아세톤 용액과 250μl의 올리브 오일을 혼합하여 1.25%(w/v) 옥사졸론(OX)을 준비합니다. 750μl의 아세톤과 250μl의 올리브 오일을 혼합하여 차량 용액을 준비합니다.
5. 마취 칵테일(1.1)의 복강내(IP) 주사로 마우스를 재마취합니다. 이전과 같이 귀 두께를 측정합니다.
6. 오른쪽 귀 양쪽에 1.25% OX 12.5μl를 바릅니다. 12.5μl의 아세톤/올리브 오일 비히클 용액을 왼쪽 귀 양쪽에 바릅니다.
7. 다른 생쥐가 귀를 모욕하지 않도록 완전히 회복될 때까지 생쥐를 케이지 동료와 분리한 다음 원래 우리에 쥐를 다시 넣고 동물 수용 시설로 되돌려 보냅니다.
   메모: 제모는 귀 두께의 변화에 따라 경미한 피부 염증을 유발할 수 있습니다. 이 경미한 염증은 3일 후에 정상적인 귀 두께로 확인되어 해결됩니다. 24시간 동안 국소적으로 도포한 후, OX로 처리된 귀는 차량 용액으로만 치료한 귀에 비해 현저한(p < 0.01) 부종을 보입니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
케타민 염산염	호스피라	국회 제0409-2051-05
자일라진	로이드 연구소	나다 #139-236
아세프로마진	베링거인겔하임	아나다 200-361
제모 크림	교회 & 드와이트
아세톤	피셔 사이언티픽	A16P4
옥사졸론	시그마-알드리치	E0753

호