염증 마우스 모델에서 혈액 세포-내피 상호 작용을 분석하기 위한 생체 내 현미경 검사

초록

출처: Herr, N. et al., 생쥐의 장간막 정맥에서 백혈구-내피 및 혈소판-백혈구 상호 작용의 생체 내 현미경 검사. J. Vis. 특급. (2015년)

이 비디오에서는 복강내에 지질다당류를 주입한 마우스 모델의 장간막 정맥에서 혈액 세포-내피 상호 작용의 실시간 시각화를 보여줍니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 동물 취급, 염증의 준비 및 유도

1. 체중 범위가 16 - 20 g인 4 - 6 주 된 수컷 마우스를 사용하십시오. 참고 : 마우스가 더 나이가 많거나 무거우면 혈관 주변에 과도한 지방이 나타나 현미경 관찰이 제한됩니다.
2. 수술 전에 모든 도구와 현미경 테이블을 소독하십시오.
3. 현미경 검사 4시간 전에 20mg/kg LPS(지다당류)를 살아있는 마우스에 복강내 주사하여 세균성 염증을 유발합니다.
4. 0.9% 식염수를 37°C의 수조에서 예열하여 플라스틱 챔버와 장간막 조직을 가습합니다.
5. 현미경 검사 절차 직전에 케타민(100mg/kg)과 자일라진(5mg/kg)의 복강 내 주사로 마우스를 마취합니다. 대체 마취를 사용할 수 있습니다(예: 2% 이소플루란 흡입). 반사 자극에 대한 반응 상실(강한 압력으로 발가락 또는 꼬리 꼬집음)으로 적절한 마취를 확인합니다.
6. 면도기를 사용하여 복부를 제모하고 에탄올 70 %를 적신 거즈로 느슨한 머리카락을 제거합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
로다 민 6G	시그마-알드리치	989-38-8
대장균에서 지방다당류 055:B5	시그마-알드리치	L2637