숙주 모기 유래 포자동물을 이용한 실험적 뇌성 말라리아의 마우스 모델 생성

초록

출처: Hoffmann, A. et al., 자기 공명 영상을 사용한 실험적 뇌성 말라리아 모델에서 부종 발달 및 미세혈관 병리학의 생체 내 추적.J. Vis. 특급(2017년)

이 비디오는 뇌성 말라리아의 실험용 마우스 모델의 생성을 보여줍니다. Plasmodium berghei에 감염된 암컷 모기에서 분리된 포자암을 구속된 쥐의 꼬리 정맥에 주입하여 혈액-뇌 장벽 파괴 및 뇌 염증을 유발하여 뇌성 말라리아를 유발합니다. 이 감염된 마우스 모델은 뇌성 말라리아와 관련된 생체 내 미세혈관 병리학을 연구하는 데 유용한 도구를 제공합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 감염

1. Anopheles stephensi 모기를 gametocytemic 마우스에 15분 동안 먹이를 주어 Plasmodium berghei ANKA에 감염시킵니다. 감염된 모기를 습도 80%, 21°C에서 유지하십시오.
2. 혈액 식사 후 17일에서 22일 후에 우리에서 암컷 모기를 수집합니다. 얼음 위에 올려 마취시킵니다.
3. 집게를 사용하여 차가운 RPMI 배지 한 방울로 덮인 유리 슬라이드에 3-4 마리의 모기를 놓습니다. 슬라이드를 현미경 아래에 놓습니다.
4. 집게를 사용하여 머리와 몸통 사이에 모기를 조심스럽게 펴십시오. 주사기와 바늘을 사용하여 침샘을 분리합니다. 나머지 모기에 대해 이 절차를 반복합니다.
5. 유리 슬라이드에서 타액선을 유리 피펫으로 빨아들여 1.5mL 원심분리 튜브에 넣어 모읍니다.
   메모: 감염률에 따라 일반적으로 타액선당 8,000에서 15,000개의 전염성 포자암을 얻을 수 있습니다.
6. 약 3분 동안....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
이소플루란	백스터	1001747	마취용
도타렘	게베르	1086923	Gd-DTPA 조영제; 0.5mmol/ml
Amira(이미지 처리 프로그램)	FEI 그룹		버전: Amira 5.3.2
MATLAB을	매스웍스, Inc.,		릴리즈 2012b
FDT 도구 상자	FMRIB의 소프트웨어 라이브러리

참조하십시오.