쥐 모델에서 경동맥의 캐뉼레이션(cannulation of the carotid artery)

초록

출처: Trevaskis, N. L. et al., 장간막 림프관 캐뉼레이션 쥐 모델: 장 림프 약물 수송 평가에 적용. J. Vis. 특급 (2015)

이 비디오에서는 쥐 모델에서 왼쪽 경동맥을 캐뉼링하는 수술 절차를 보여줍니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 경동맥의 캐뉼레이션

경동맥 삽관은 장간막 림프관의 관을 삽관하기 전이나 후에 시행할 수 있습니다. 일부 작업자는 림프관을 캐뉼러하기 전에 경동맥을 캐뉼레이션하는 것을 선호하여 동물을 이동할 때 림프 캐뉼라가 빠질 가능성을 줄입니다.

1. 베벨 끝에서 2.5cm 떨어진 경동맥 캐뉼라에 표시를 하여 동맥에 삽입할 튜브 부분을 식별합니다. 캐뉼라의 다른 쪽 끝(즉, 베벨 없음)을 항응고 용액으로 채워진 주사기에 부착된 23 또는 25G 바늘에 연결하고 캐뉼라에 항응고 용액을 채워 에어 갭이 없는지 확인합니다.
2. 삽관을 용이하게 하기 위해 마취된 쥐를 목을 쭉 뻗고 머리가 작업자를 향하도록 등 누운 자세로 놓습니다. 일부 작업자는 쥐의 꼬리가 작업자를 향하도록 이 기술을 수행하는 것을 선호합니다.
3. 시상면의 기관 왼쪽 위 피부층을 통해 1 - 1.5 cm의 세로 절개를 합니다.
4. 뭉툭한 끝 집게를 사용하여 피하 결합 조직을 절개하여 아래에 있는 쌍을 이루는 목 근육을 노출시킵니다.
5. 목 근육을 수축시켜 왼쪽 경동맥(피부 표면에서 ~1cm 아래에 위치하며 맥동)을 드러냅니다. 둔기 절개로 동맥에서 위에 있는 결합 조직을 청소합니다.
6. 뭉툭한 조직 겸자를 사용하여 동맥의 ~1cm 부분을 조심스럽게 분리하고 인접한 미주 신경이 손상되지 않도록 주의하십시오. 동맥의 양쪽을 따라 뭉툭한 집게를 수직으로 열고 닫아 주변 조직과 미주 신경으로부터 분리하여 이를 수행합니다.
7. 가는 끝 집게를 사용하여 경동맥 아래에 두 개의 실크 봉합사를 끼우고 분리된 동맥 부분의 양쪽 끝에 놓습니다. 작업자에게 가장 가깝고 쥐의 심장과 쇄골에서 가장 먼 봉합사를 묶습니다(그림 1A).
8. 동맥 아래에 한 쌍의 곧은 가는 집게를 놓아 동맥을 통한 혈류를 막습니다(그림 1B).
9. 끝이 가는 홍채 가위를 사용하여 동맥의 윗면(고립된 영역의 상단에서 약 1/3 아래로 내려가기)에 작은 절개를 놓습니다. 동맥 표면에 엎질러진 혈액을 헤파린 식염수로 씻어내고 면봉으로 부드럽게 닦아냅니다.
10. 한 쌍의 구부러진 팁 집게로 캐뉼라의 끝을 동맥에 삽입합니다. 일단 삽입되면 혈류를 막고 있는 곧은 가는 끝 집게를 제거하고 두 쌍의 집게를 사용하여 캐뉼라를 동맥 안으로 2.5cm 전진시키는데, 하나는 캐뉼라를 동맥 내부에 고정하여 혈액이 역류하는 것을 막기 위한 것이고 다른 하나는 캐뉼라를 삽입하기 위한 것입니다.
11. 작은 동맥 클램프를 사용하여 캐뉼라를 동맥 내부에 고정하고 1.8단계에서 동맥 아래에 배치된 직선 가는 끝 집게를 제거하여 혈류를 차단합니다.
12. 캐뉼라에 항응고제 용액을 주입하고 소량의 혈액을 빼내어 캐뉼라의 개통성을 확인합니다(그림 1C). 그런 다음 항응고 용액으로 캐뉼러를 씻어내고 라이터 또는 캐뉼러 플러그의 불꽃을 사용하여 끝을 밀봉합니다.
13. 1.8단계에서 동맥 아래에 배치된 두 개의 봉합사와 함께 캐뉼라를 제자리에 묶습니다.
14. 동맥 클램프를 제거하고 동맥과 캐뉼라 주위에 세 번째 봉합사를 고정합니다. 봉합사로 목의 상처를 봉합합니다.

결과

그림 1. (A) 두 개의 실크 봉합사로 분리된 경동맥과 시술자와 가장 가까운 경동맥이 묶여 있는 사진, (B) 동맥 아래에 놓인 한 쌍의 곧은 가는 집게로 격리된 경동맥과 혈류가 막힌 사진, (C) 캐뉼라가 제자리에 있고 소량의 혈액을 채취하여 개통을 확인하는 경동맥의 사진.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
멸균 식염수	박스터 헬스케어	재질 보기 AHB 1307	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 Baxter 100ml 식염수 백, 50개 상자가 있습니다
물 중 70% 에탄올	어떤		모든 브랜드에서 사용할 수 있습니다.
헤파린(35mL 중 35000IU)	시그마 제약	337220	http://sigmaco.com.au/
폴리에틸렌(PE) 캐뉼러 외경 0.96mm x 내경 0.58mm	마이크로튜브 확장	PE8050	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 PE 튜빙 0.8x0.5mm, 30m가 있습니다
폴리에틸렌(PE) 캐뉼라 외경 0.8mm x 내경 0.5mm	마이크로튜브 확장	체육9658	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 PE 튜빙 0.96x0.58mm, 30m가 있습니다
통치자	어떤		모든 브랜드에서 사용할 수 있습니다.
마커	어떤		모든 브랜드에서 사용할 수 있습니다.
담배 라이터	어떤		모든 브랜드에서 사용할 수 있습니다.
23 게이지 바늘	리빙스턴 국제공항	DN23GX0.75LV	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 Livingstone Disposable Needle, Sterile, 23GX0.75inch, 100/BOX가 있습니다. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT= 6&검색=DN23GX0.75LV
25 게이지 바늘	리빙스턴 국제공항	DN25GX1.0LV	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 Livingstone Disposable Needle, Sterile, 25GX1.0inch, 100/BOX가 있습니다. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search= DN25GX1.0LV
주사기 1ml	리빙스턴 국제공항	T3SS01TA	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 Terumo 주사기 1ml 슬립 투베르쿨린 100/박스가 있습니다. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS01TA
주사기 10ml	리빙스턴 국제공항	T3SS10SA	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 테루모 주사기 10ml 슬립 100/상자입니다. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS10SA
거즈 면봉	리빙스턴 국제공항	GSC075	모든 브랜드를 사용할 수 있으며 필요한 크기로 절단할 수 있습니다. 예를 들면 면 7.5x7.5cm, 8 겹으로 채워진 거 즈 면봉입니다. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =GSC075
면봉	리빙스턴 국제공항	CTAST075DP	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 리빙스턴 코튼 어플리케이터 플라스틱 더블 팁이 있습니다. 75MM. 100/PK. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =CTAST075DP
실크 봉합사	리빙스턴 국제공항	DTSK163019F4
메스 블레이드	정밀 과학 도구(FST)	10020-00	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 FST 메스 블레이드 #20이 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=191
메스 손잡이	정밀 과학 도구(FST)	10004-13	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 다음은 FST 메스 핸들 #4의 예입니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=298&CategoryId=51
1 x 작은 수술 용 가위	정밀 과학 도구(FST)	14060-09	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 FST 파인 가위, 9cm, 21mm 절삭 날, 날카롭고 곧은 가위가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=40&CategoryId=17
톱니 모양의 곡선 팁이있는 집게 2 개	정밀 과학 도구(FST)	11001-13	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 곡선 2.8x1.4mm 팁이 있는 FST 13cm 표준 패턴 집게가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=405&CategoryId=32
1 x 홍채 절제술 가위	정밀 과학 도구(FST)	15000-08	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 FST Vannas 스프링 가위-2.5mm 커팅 엣지, 스트레이트가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=17&CategoryId=16
1 x 직선 톱니 팁이있는 집게	정밀 과학 도구(FST)	11650-10	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 톱니 모양의 1 x 0.99mm 팁이있는 FST Graefe 10cm 직선입니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=390&CategoryId=32
1 x 부드럽고 날카로운 직선 파인 팁이있는 집게	정밀 과학 도구(FST)	11251-10	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 FST Dumont #5 핀셋 스트레이트 11cm, 팁 0.08 x 0.04mm가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=335&CategoryId=29
매끄럽고 미세한 곡선 집게가 있는 집게 1	정밀 과학 도구(FST)	11063-07	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 부드러운 9 x 0.4mm 팁이 있는 0.3cm의 FST 섬세한 집게가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=360
1 x 봉합사 바늘 홀더	정밀 과학 도구(FST)	12001-13	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 길이 16mm x 너비 1.9mm 팁이 있는 FST 13cm Hasley 바늘 홀더가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=254&CategoryId=70
1 x 동맥 클램프	정밀 과학 도구(FST)	18050-28	모든 브랜드를 사용할 수 있습니다. 예를 들면 FST Bulldog Serrefines 스트레이트, 길이 28mm, 턱 치수 9x1.6mm, 미디엄 클램프 프레스가 있습니다. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=270&CategoryId=82

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