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방법 논문

전처리된 인간 혈소판의 콜라겐 유도 응집을 모니터링하기 위한 탁도 분석

1.3K 조회수

⸱

2025년 7월 8일

이 논문에서

초록

출처: Molica, F. et al., 혼탁계: 인간 세척 혈소판에 대한 탁도 측정: 콜라겐 유도 응집에 대한 판넥신1 억제제 브릴리언트 블루 FCF의 효과.J. Vis. 특급(2017년)

이 비디오는 사전 처리되고 세척된 인간 혈소판에서 콜라겐 유도 혈소판 응집을 평가하기 위한 탁도 분석을 보여줍니다. 대조군 웰은 콜라겐 유도 응집을 보이는 반면, 고농도의 억제제는 판넥신-1 채널을 차단하여 콜라겐 유도 혈소판 응집을 억제하며, 이는 변하지 않은 탁도에서 알 수 있습니다.

프로토콜

인간 참가자와 관련된 모든 절차는 인간 복지를 위한 제도적, 국가적, 국제적 지침에 따라 수행되었으며 지역 기관 검토 위원회의 검토를 거쳤습니다.

1. 인간 혈액 채취 및 세척된 혈소판 분리를 위한 완충액 준비

  1. 1.4g의 구연산 일 수화물 (C6H8O7 • H2O, 66.6 mM), 2.5g의 구연산 삼 수화 물 (Na3C6H5O7 • 2 H2O, 85 mM) 및 무수 D (+) -포도당 2g을 용해하여 산-구연산 포도당 (ACD) 100mL 수용액을 준비합니다. 용액의 pH는 약 4.5입니다.
  2. 다음과 같이 Tyrode의 완충액을 위한 저장 용액을 준비합니다
    1. 80g의 염화나트륨(NaCl), 2g의 염화칼륨(KCl), 10g의 중탄산나트륨(NaHCO3) 및 0.58g의 인산이수소나트륨(NaH2PO4*H2O)을 증류된 H2O 500mL에 용해시켜 원액 1을 준비합니다. 각각의 최종 농도....

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결과

figure-results-1
그림 1: 응집법(aggregometry). (A) 응집법(aggregometry)에 사용된 유리 큐벳(교반 자석 포함)의 대표 이미지. 왼쪽의 큐벳은 휴지 중인 혈소판을 보여주고, 오른쪽의 큐벳은 콜라겐 유도 활성화 후의 혈소판 응집을 보여줍니다. (B) 탁도 측정을 위한 8-well 응집계의 대표 이미지. 37°C에서 유리 큐벳에 존재하는 혈소판 현탁액을 배양하는 데 사용되는 웰(별표)과 측정에 사용되는 웰(흰색 화살표)은 C로 표시됩니다.

....

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공개 사항

선언된 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
구연산 일 수화물 (C6H8O7 * H2O)로스5949-29-1눈 손상/자극의 위험이 있습니다.
구연산 삼 나트륨 이수화물 (Na3C6H5O7 * 2H2O)시그마-알드리치S1804 (영어-
D(+)-포도당시그마-알드리치G8270-
염화나트륨 (NaCl)시그마-알드리치S9888-
염화칼륨 (KCl)시그마-알드리치P9541-
중탄산 나트륨 (NaHCO3)시그마-알드리치S6014-
나트륨 dihydrogenophosphate 일 수화물 (NaH2PO4 * H2O)시그마-알드리치S9638-
염화마그네슘 육수화물 (MgCl2*6H2O)시그마-알드리치M9272-
염화칼슘 육수화물 (CaCl2*6H2O)시그마-알드리치442909눈 손상/자극의 위험이 있습니다.
N-2-하이드록시에틸피페라진-N-2-에탄 설폰산(Hepes)써모피셔 사이언티픽15630-
인간 혈청 알부민CSL 베링00257/374-
염산시그마-알드리치320331호흡기에 부식성 및 자극성이 있습니다. 심각한 피부와 눈에 손상을 줄 수 있습니다.
에펜도르프 5810 R피셔 사이언티픽--
덤플링을드로스팜 AG/SA20810
프로스타사이클린 I2(PGI2)케이맨18220-
감자에서 Apyrase시그마-알드리치A6535-
피브리노겐(헤모콤플레탄)CSL 베링HS 73466011-
혈전 집포계 SD-MedicalSD-이노베이션타8V-
브릴리언트 블루 FCF (Erioglaucine disodium salt)시그마-알드리치80717오래 지속되는 효과로 수생 생물에 유해함 (환경으로의 방출을 피하십시오)
콜라겐혼, 나이코메드-
아라키돈산바이오/데이터 주식회사C/N 101297-
셀 카운터 시스멕스 KX-21N시스멕스 디지타나--
헤페스지브코제15630-056-
유리 큐벳SD-이노베이션THCV1000-
자석 교반기SD-이노베이션THA100-
) (영문) 시리즈 년 년 년 호

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